各種類型的色譜泵有不同的操作方法??梢詤⒄崭髯缘牟僮魇謨浴,F(xiàn)簡要介紹如下:
1、準備好工具和所需部件。工具包括扳手、10#木螺釘、超聲清洗粉、墊圈安裝工具、新墊圈。用水-甲醇沖洗泵,拆開進出口管道,在泵頭和單向閥上標出液流方向。
2、將柱塞桿縮至zui小,松開色譜泵泵頭的兩根收緊螺絲,小心托住泵頭。操作時要注意處處以平衡的動作慢慢退出泵頭,切不可搖動或上下左右擺動泵頭,否則柱塞桿極易折斷。退出泵頭后,柱塞桿還留在泵上。
3、用10#的木螺釘旋進就螺釘孔中輕輕撥出舊墊圈,注意不要劃破泵頭。要毫不猶豫的扔掉舊的墊圈。
4、將色譜泵泵頭和新墊圈分別放入甲醇中超聲清洗,同時用無纖維紙擦洗柱塞桿。查看柱塞桿上有無劃痕,如有劃痕則應(yīng)先更換新的柱塞桿在換新的墊圈。
5、安上新墊圈。這一步要用專門的安裝工具,切不可粗心大意,避免損壞墊圈。有寫公司專門出售安墊圈的工具,有詳細的說明與圖解。選一根略粗于柱塞桿的不銹鋼桿,截成約5厘米長,一端精密磨制成與柱塞桿同粗細的、有很高光潔度的面。選一根直徑大于柱塞桿約2mm、壁厚2 mm,長約3cm,一端截面平整光滑的銅管,操作時將不銹鋼桿光滑端從墊圈無彈簧的一側(cè)輕輕插入,插至墊圈不掉下來即可。將墊圈有彈簧的一側(cè)對準泵室,再給不銹鋼桿套上銅管,用光滑的一面輕輕向泵室壓墊圈,同時抽出不銹鋼桿,繼續(xù)用拇指將墊圈壓入泵頭,加上墊圈。
6、重新裝上色譜泵泵頭。先在柱塞桿上滴幾滴甲醇以濕潤,滑動泵頭到位。千萬不能搖動或擺動,以防止柱塞桿在這一步操作時折斷。平衡地上緊固定螺絲,接上進液管道。
7、zui后,打脫氣的甲醇到泵腔中,不斷用紙巾從泵出口處吸去流動液,等無氣泡溢出時再接上輸出管道,打開泄液閥,繼續(xù)抽20ml甲醇趕走氣泡后,換成需要的流動相。
為了延長色譜泵的使用壽命和維持其輸液的穩(wěn)定性,必須按照下列注意事項進行操作:
?、俜乐谷魏喂腆w微粒進入泵體,因為塵?;蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應(yīng)預(yù)先除去流動相中的任何固體微粒。流動相在玻璃容器內(nèi)蒸餾,而常用的方法是濾過,可采用Millipore濾膜(0.2m或0.45m)等濾器。色譜泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。
②流動相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),含有緩沖液的流動相不應(yīng)保留在泵內(nèi),尤其是在停泵過夜或更長時間的情況下。如果將含緩沖液的流動相留在泵內(nèi),碳硫分析儀由于蒸發(fā)或泄漏,甚至只是由于溶液的靜置,就可能析出鹽的微細晶體,這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等。因此,必須泵入純水將泵充分清洗后,再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護的溶劑。
?、凵V泵工作時要留心防止溶劑瓶內(nèi)的流動相被用完,否則空色譜泵運轉(zhuǎn)也會磨損柱塞、缸體或密封環(huán),zui終產(chǎn)生漏液。
?、茌斠罕玫墓ぷ鲏毫Q不要超過規(guī)定的zui高壓力,否則會使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。
?、萘鲃酉鄳?yīng)該先脫氣,以免在泵內(nèi)產(chǎn)生氣泡,碳硫分析儀影響流量的穩(wěn)定性,如果有大量氣泡,泵就無法正常工作。
如果色譜泵產(chǎn)生故障,須查明原因,采取相應(yīng)措施排除故障:
?、贈]有流動相流出,又無壓力指示。原因可能是泵內(nèi)有大量氣體,這時可打開泄壓閥,使泵在較大流量下運轉(zhuǎn),將氣泡排盡,也可用一個50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體。色譜泵另一個可能原因是密封環(huán)磨損,需更換。
?、趬毫土髁坎环€(wěn)。原因可能是氣泡,需要排除;或者是單向閥內(nèi)有異物,可卸下單向閥,浸入丙酮內(nèi)超聲清洗。有時可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡,或被鹽的微細晶?;蜃躺奈⑸锊糠侄氯?,這時,可卸下砂濾棒浸入流動相內(nèi)超聲除氣泡,或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸內(nèi)迅速除去微生物,或?qū)Ⅺ}溶解,再立即清洗。
?、凵V泵壓力過高的原因是管路被堵塞,需要清除和清洗。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏。檢查堵塞或泄漏時應(yīng)逐段進行。