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干貨丨超臨界流體色譜法的特點(diǎn)與適用范圍
超臨界流體色譜法
以超臨界流體作為流動(dòng)相的色譜技術(shù)被稱為超臨界流體色譜法。雖然超臨界流體色譜法20世紀(jì)60年代就出現(xiàn)了，但是直到21世紀(jì)才得到成功應(yīng)用。目前超臨界流體色譜法仍然是較新的色譜分析方法，很多人對(duì)它的了解不多，下面就簡(jiǎn)單介紹一下它的特點(diǎn)與適用范圍。
超臨界流體色譜法與氣相色譜法以及高效液相色譜法的比較
超臨界流體色譜法主要用于分析可溶的多種化合物；其分離原理為CO2作為流動(dòng)相通過改變色譜柱、壓力和溫度、添加有機(jī)助溶劑來調(diào)節(jié)分離；分析揮發(fā)性化合物時(shí)不需要衍生化。
氣相色譜法主要用于分析易揮發(fā)、難降解的化合物；其分離原理是通過改變色譜柱、溫度來調(diào)節(jié)分離；樣品需氣化才能分離，有時(shí)需要衍生化。
高效液相色譜法主要用于分析多種可溶的、加熱易降解的化合物；其分離原理是通過改變色譜柱、流動(dòng)相和溫度來調(diào)節(jié)分離；有時(shí)需要衍生化。
超臨界流體色譜法和氣相色譜法、高效液相色譜法有不同的選擇性，可以和氣相色譜法、高效液相色譜法形成很好的互補(bǔ)。對(duì)于復(fù)雜體系樣品，超臨界流體色譜法結(jié)合其他的色譜分離手段可以更加完整的對(duì)樣品進(jìn)行分析。
超臨界流體色譜法通常是一種正相技術(shù)，因?yàn)榻M分按極性由低到高的程序運(yùn)行。然而超臨界流體色譜法與正相HPLC相比具有顯著的優(yōu)勢(shì)，其平衡速度極快，重現(xiàn)性非常出色，甚至可以進(jìn)行水性樣品分析。
超臨界流體色譜法的適用范圍
超臨界流體色譜法非常適合用于分離極性很低的化合物，例如許多天然產(chǎn)物。包括脂溶性維生素、脂溶性藥物雜質(zhì)、類胡蘿卜素和脂質(zhì)。對(duì)于此類樣品，常以C18作為固定相。在脂溶性化合物的分離上基本可以*代替正相色譜，并獲得更佳的分離效果。早期大多數(shù)應(yīng)用使用純CO2、壓力程序和火焰離子化檢測(cè)器(FID)。
超臨界流體色譜法是分離各種結(jié)構(gòu)類似物的較好選擇，例如各種手性藥物異構(gòu)體(包括手性藥物雜質(zhì))，位置異構(gòu)體、順反異構(gòu)體等。
超臨界流體色譜法可以分析揮發(fā)性化合物，特別是對(duì)于熱不穩(wěn)定的揮發(fā)性化合物，分析揮發(fā)性化合物時(shí)不需要衍生化，并且可以從分析放大到制備SFC，突破GC不能制備的瓶頸。
超臨界流體色譜法還在藥物代謝產(chǎn)物研究、中藥分析研究等方面獲得廣泛應(yīng)用。