當今蛋白質組學的關注焦點和研究趨勢已經(jīng)逐漸從定性分析轉向定量分析。 定量蛋白質組學是對 細胞、組織乃至完整生物體的蛋白質表達進行定量分析,對生物過程機理的探索和臨床診斷標志物的發(fā)現(xiàn) 與驗證具有重要意義[1,2] 。 定量蛋白質組學分為相對定量與定量[3] 。 相對定量即差異比較,通過質譜 大規(guī)模、高通量地對兩種或多種不同生理、病理條件下的樣本進行定量分析,獲得蛋白質表達量的差 異,主要方法有穩(wěn)定同位素標記和非標記兩種技術手段[4,5] 。 定量即獲得蛋白的具體表達量,利用 質譜監(jiān)測目標蛋白的專一性肽段(Unique Peptide)獲得色譜鄄質譜峰面積,并與已知量的標準肽段(外標 法)或穩(wěn)定同位素標記的重標肽段(內標法)比較確定具體量,實現(xiàn)定量。 主要質譜方法是對專一 性肽段進行選擇反應監(jiān)測或稱多反應監(jiān)測(Selected / Multiple reaction monitoring, SRM/ MRM) [6] 。
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