數(shù)據(jù)非依賴采集(Data-Independent Acquisition, DIA)是當(dāng)前 熱門的質(zhì)譜采集技術(shù)之一,它以非目標(biāo)的方式將質(zhì)量范圍 分為若干窗口,依次并循環(huán)采集窗口內(nèi)所有母離子的二級(jí)碎片 [1,2]。DIA 與 SRM 類似,也是基于子離子(transition)定量, 相比傳統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)定量方法具有更好的選擇性和更高的準(zhǔn)確 度。然而,目前DIA在翻譯后修飾分析上仍有較大瓶頸。DIA 依賴于 DDA 建立譜圖庫(kù),而 DDA 數(shù)據(jù)在搜庫(kù)鑒定時(shí),修飾 位點(diǎn)定位錯(cuò)誤的概率較高,特別是磷酸化修飾發(fā)生在常見(jiàn)的 S/T/Y 上,若肽段含有 2 個(gè)或以上位置接近的 S/T/Y,位點(diǎn)就 容易找錯(cuò)。將含有錯(cuò)誤位點(diǎn)信息的鑒定結(jié)果作為譜圖庫(kù),就會(huì) 導(dǎo)致翻譯后修飾 DIA 解析結(jié)果的不可靠[3]。因此,DIA 尚難用 于大規(guī)模的翻譯后修飾樣本分析。
質(zhì)譜條件 質(zhì)譜儀:Orbitrap Fusion(Thermo Scientific); 離子源:NanoFlex;離子模式:正離子;噴霧電壓:1.8 kV; 毛細(xì)管溫度:275°C;S-Lens RF:60%
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賽默飛色譜及質(zhì)譜 | 下載次數(shù) |
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