目標: 本文應用非靶向代謝組學闡釋了在不同生長條件下,誘導劑類型和濃度 對工程菌代謝指紋譜圖的影響。
簡介: 制藥、農(nóng)業(yè)以及加工制造業(yè)對特種化合物的巨大需求,一直是現(xiàn)代化學 工業(yè)面臨的巨大挑戰(zhàn)之一。而現(xiàn)代化學工業(yè)需要在日益嚴格的監(jiān)管審查 情況下,不得不提出環(huán)境友好型的生產(chǎn)方法。由合成生物學和科技驅(qū)動 的生物技術方法被認為是有潛力能夠提供必要的持續(xù)解決方案。合成生 物學的核心是將“設計-構建測試框架1”應用于重新設計的天然生物系 統(tǒng)內(nèi)以實現(xiàn)目的。通過在微生物(例如大腸桿菌2和鏈霉菌屬3)的“ 生物工廠”中插入和微調(diào)遺傳信息,組裝復雜的酶促途徑以實現(xiàn)化學物 質(zhì)的快速和多樣化生成。像異丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG) (Lac啟動子)或四環(huán)素(Tet啟動子)這樣的誘導型細菌啟動子,通常用 于激活基因轉(zhuǎn)錄,開啟工程化生物合成途徑。然而,人們還未*掌握 這些誘導系統(tǒng)與整個細菌代謝組的相互作用,尤其是毒副作用方面的影 響。
本研究的目的是研究不同增長條件下,如何應用非靶向代謝組學了解誘 導劑類型和濃度對工程菌(含有IPTG誘導型紅色熒光蛋白表達質(zhì)粒pBbA1a-RFP的大腸桿菌DH5α)代謝指紋譜圖的影響。這種表型信息有可 GC-Orbitrap/MS結合高分辨代謝物數(shù)據(jù)庫 在合成生物學非靶向代謝物分析的應用研究 能為上游基因調(diào)控提供參考,同時也可更好地定義該啟動子 在生化途徑表達中的有效用途。
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