傳統(tǒng)中藥以口服用藥為主，其化學成分受胃腸道酸堿性、腸道微生物及代謝酶等影響常發(fā)生轉(zhuǎn)化，使其生物利用度降低，體內(nèi)除中藥原形成分外，還可能有大量代謝產(chǎn)物的存在，這些體內(nèi)吸收化學成分是闡明中藥發(fā)揮藥效機制的直接物質(zhì)基礎。要想揭示中藥體內(nèi)藥效物質(zhì)，代謝產(chǎn)物研究是*的重要組成部分，尤其是苷類及其他結構易轉(zhuǎn)化的化學成分(如萜類等)，其生物利用度較低，在體內(nèi)主要以代謝產(chǎn)物的形式存在，在此種情況下，代謝產(chǎn)物可能是藥效的或主要來源。 然而，由于中藥成分的代謝規(guī)律不明確、代謝產(chǎn)物含量低難以鑒定等原因，大大制約了中藥體內(nèi)藥效物質(zhì)基礎的研究。
為了更加深入的研究中藥體內(nèi)藥效物質(zhì)基礎，需要利用高分辨質(zhì)譜對中藥體內(nèi)代謝物進行更深度的鑒定分析。然而由于中藥體內(nèi)的代謝物通常含量很低，且同時受到基質(zhì)背景的干擾，傳統(tǒng)LC Q-TOFMS高分辨質(zhì)譜的DDA數(shù)據(jù)采集模式難以獲得低含量代謝物的二級質(zhì)譜圖用于結構鑒定。新-代Orbitrap ID-X Tribrid三合 -質(zhì)譜儀由于具有Acquire X智能化數(shù)據(jù)采集模式，自動迭代生成排除列表及包含列表，可以獲得極低含量組分的多級質(zhì)譜用于代謝物的深度分析。
柴胡Bupleuri Radix為傘形科植物柴胡(又稱北柴胡) Bulpeurum chinese DC.和狹葉柴胡(又稱南柴胡) Bulpeurum scorzonerifo-lium Willd的干燥根，其性味苦涼、微寒，具有解表和里、疏肝解郁、升舉陽氣之功效。柴胡化學成分復雜，其中皂苷類、揮發(fā)油類、黃酮類為柴胡的主要活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)、抗抑郁、保肝、抗腫瘤、解熱抗炎等藥理作用。近年來，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(LC-MS)的成熟與發(fā)展已被應用于柴胡皂苷類組分的代謝研究]。然而，單個活性組分的代謝研究以及部分代謝物的鑒定結果仍然無法全面綜合的評價柴胡的質(zhì)量和體內(nèi)藥效物質(zhì)基礎。
本實驗采用離體實驗的代謝研究方法，通過具有AcquireX采集功能的Orbitrap ID-X Tribrid MS技術對柴胡代謝產(chǎn)物進行整體分析。首先用富含腸內(nèi)菌的糞便懸浮液與柴胡提取物在厭氧條件下溫孵，利用Compound Discoverer 3.0代謝物分析軟件對采集的高分辨質(zhì)譜數(shù)
據(jù)進行解析，終構建柴胡的腸內(nèi)菌代謝指紋圖，以期為中藥的臨床合理應用奠定理論基礎。
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