一、實驗原理
脂肪是丙三醇(甘油)和脂肪酸結合成的脂類化合物,能溶于脂溶性有機溶劑。
本實驗用重量法,利用脂肪能溶于脂溶性溶劑這一特性,用脂溶性溶劑將脂肪提取出來,借蒸發(fā)除去溶劑后稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進行。
通常使用的脂溶性溶劑為ether或沸點為30-60℃的石油醚。
用此法提取的脂溶物質除脂肪外,還含有游離脂肪酸、磷脂、固醇、芳香油及某些色素等,故稱為“粗脂肪”。
二、實驗用品
(一)器材
(1)水浴鍋。
(2)烘箱。
(3)索氏提取器一套,研缽一個。
(4)分析天平。
(二)試劑
無水Ether(AR)
(三)材料
樣品(芝麻、花生、大豆或玉米)。
二、實驗程序
(一)操作方法
1.裝置索氏脂肪提取器(如下圖)
2. 樣品制備
將樣品置80~100℃真空烘箱中烘至恒重,放冷后研成粉末,稱取樣品3g,放入干燥濾紙筒內,以脫脂棉花蓋之。
3. 提取
將盛有樣品的濾紙放入索氏提取器內,注意勿使筒內樣品高出提取器的虹吸管)加入Ether約占提取管窖1/3,以浸濕樣品,同時向已知重量的提取瓶內加入約占其容積1/3的Ether。將儀器各部連接如上圖,夾穩(wěn),并置于恒溫水浴鍋上,使提取瓶底部浸入水中,開啟自來水,使水從冷凝器下孔注入,上孔流出,然后開啟水浴鍋開關,加熱水浴。當溫度上升至Ether沸點時,Ether開始沸騰,并形成蒸汽由連接管上升至冷凝器,蒸氣遇冷而凝結成液體,滴入提取管內將樣品浸泡,樣品的脂肪便溶于其中,當液面超過虹吸管上端時,溶有脂肪的Ether經虹吸管注入提取瓶。調節(jié)水浴溫度50~60℃,使Ether每小時循環(huán)3~5次,提取時間視樣品性質而定,通常要12~16h。
4. 干燥及稱重
提取完畢后,卸下的提取瓶,在水浴上蒸餾加收Ether(避免著火)。清洗提取瓶外壁,后把提取瓶置104℃恒溫箱中烘至恒重。
5結果計算
注意事項:Ether為易燃有機溶劑,實驗室應保持并通風并禁止任何明火。
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