一、實驗原理

近年來，聚丙烯酰胺脲梯度電泳成為研究蛋白質(zhì)去折疊與再折疊的非常重要的實驗技術(shù)之一。脲梯度電泳的基本原理是在常規(guī)的聚丙烯酰胺凝膠中加入非離子型變性劑-尿素，使其形成脲濃度梯度。

電泳時將脲梯度置于垂直電泳方向，使同一蛋白質(zhì)樣品在連續(xù)變化的不同濃度的脲環(huán)境中電泳，蛋白質(zhì)分子隨脲濃度變化而發(fā)生的結(jié)構(gòu)狀態(tài)的變化，因而表現(xiàn)出不同的遷移率，終在顯色后的凝膠中呈現(xiàn)出反映蛋白質(zhì)構(gòu)象變化的二維圖像。

二、實驗用品

  （一）器材

（1）Bio-Rad公司垂直板型電泳裝置。

（2）蠕動泵。

（3）梯度混合器、電磁攪拌器及電磁攪拌子。

（4）1ml 和100µL微量進樣器，注膠用的細(xì)長針管。

（二）試劑  

（1）電極緩沖液的選擇：緩沖液的選擇取決于樣品蛋白質(zhì)的性質(zhì)，如等電點、溶解度、穩(wěn)定性和實驗?zāi)康牡取?/span>

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