可見(jiàn)分光光度計(jì)(又名可見(jiàn)光度計(jì)、分光光度計(jì))是可見(jiàn)光分光光度法是采用新的單片機(jī)技術(shù),開(kāi)發(fā)出能夠進(jìn)行定量測(cè)量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)量,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);OD值直接測(cè)量(吸光度、透過(guò)率和能量等直讀);動(dòng)力學(xué)測(cè)試(測(cè)出物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對(duì)某一種物質(zhì)進(jìn)行全波段掃描,分析物質(zhì)的特征波長(zhǎng),判斷實(shí)驗(yàn)過(guò)程的誤差);多波長(zhǎng)測(cè)試(可以對(duì)物質(zhì)同時(shí)進(jìn)行多個(gè)波長(zhǎng)的測(cè)試,分析物質(zhì)的相關(guān)特性);
分光光度計(jì)的原理
(一)基本原理
分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)某種波長(zhǎng)的光具有選擇性吸收的特性建立起來(lái)的鑒別物質(zhì)或測(cè)定其含量的一項(xiàng)技術(shù)。當(dāng)一束單色光通過(guò)溶液時(shí),一部分被吸收,一部分則透過(guò)溶液。設(shè)入射光強(qiáng)度為io。,透射光強(qiáng)度為it,,則透光度t=it/io,吸光度(a)或光密度(o.d)或稱消光度(e)則可表示為a=-lgt。根據(jù)lambert-beer定律,吸光度與溶液的濃度成正比,與光束通過(guò)溶液的距離(即光程)成正比,用數(shù)學(xué)表達(dá)式表示為:
a=klc
式中c代表該物質(zhì)的濃度,l代表光程,一般以cm表示,k為摩爾消光系數(shù),即當(dāng)溶液濃度為lmol/l,光程為1cm時(shí)所測(cè)得的一定波長(zhǎng)下的吸光度。由于單色光透過(guò)溶液時(shí),不僅被待測(cè)物質(zhì)所吸收,而且還被比色容器與溶劑以及其它試劑吸收一部分,這部分需用空白管消除(空白液的做法即用與樣本相同的一切試劑,而不含被測(cè)定的物質(zhì))
分光光度儀器常規(guī)的維護(hù),分光光度儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動(dòng).,為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使時(shí)不要開(kāi)光源燈,單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開(kāi),為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。分光光度儀器維護(hù):
(1)分光光度儀器工作電源一般為220V,允許10%的電壓波動(dòng)。
(2)為了延長(zhǎng)光源使用壽命,在不使時(shí)不要開(kāi)光源燈。
(3)單色器是儀器的核心部分,裝在密封盒內(nèi)不能拆開(kāi),為防止色散元件受潮發(fā)霉,必須經(jīng)常更換單色器盒干燥劑。
(4)必須正確使用吸收池,保護(hù)吸收池光學(xué)面。
(5)光電轉(zhuǎn)換元件不能長(zhǎng)時(shí)間暴光,應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。