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利用 SC-ICP-MS 法測(cè)定單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中的鐵含量

閱讀:270      發(fā)布時(shí)間:2019-01-24
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    鐵是細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)部進(jìn)行各種生物過程所必須的金屬輔助因子。通常,鐵作為一種可抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)元素,細(xì)胞中的總鐵含量限額取決于細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)和代謝需要。細(xì)菌已進(jìn)化出復(fù)雜的系統(tǒng)來調(diào)節(jié)細(xì)胞中鐵含量。

1 細(xì)胞內(nèi)多余的可溶性鐵是有毒的,這是由于過量的可溶性鐵產(chǎn)生會(huì)損傷細(xì)胞組分的活性氧,這意味著必須嚴(yán)格控制細(xì)胞中的鐵含量。然而,目前我們尚無法確定單個(gè)細(xì)胞內(nèi)及整個(gè)細(xì)胞群內(nèi)鐵含量的調(diào)節(jié)情況。在確定細(xì)胞生長(zhǎng)條件和應(yīng)激反應(yīng)的影響時(shí),包括因使用抗生素產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng),在近乎實(shí)時(shí)地測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞中的鐵含量可提供關(guān)于細(xì)菌中鐵耐受限值的信息。有趣的是,某些具有殺菌作用的粘土礦物和粘土提取物中的可溶性鐵含量很高,這可能會(huì)破壞細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡,導(dǎo)致細(xì)菌死亡。

2 此外,監(jiān)測(cè)單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的鐵含量還可了解細(xì)胞中鐵的分布情況,從而確定細(xì)胞群的同質(zhì)性。 ICP-MS 法可以分析成批培養(yǎng)的細(xì)菌細(xì)胞中的總金屬含量,然后根據(jù)測(cè)得的細(xì)胞總數(shù)平均算出單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的鐵含量。

3 由于平板計(jì)數(shù)法無法計(jì)算死亡細(xì)胞或未被培養(yǎng)的完整細(xì)胞,導(dǎo)致計(jì)數(shù)出現(xiàn)誤差。然而,由于儀器的限制,目前還未見有方法可直接分析單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞中的鐵含量。

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珀金埃爾默企業(yè)管理(上海)有限公司

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