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細胞庫

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進口ELISA試劑盒: 現(xiàn)貨HUMAN NGAL ELISA KIT

自產(chǎn)ELISA試劑盒,試劑盒: 人ELISA試劑盒小鼠ELISA試劑盒

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大鼠細胞,大鼠細胞系

細胞株,細胞系,傳代細胞: 白鰱細胞斑馬魚細胞豹貓細胞成人細胞赤狐細胞大額牛細胞大耳山羊細胞大黃魚細胞大長舌果蝠細胞俄勒岡地鼠細胞非洲綠猴細胞高背鯽魚細胞果蠅細胞果子貍細胞荷蘭黑白花奶牛細胞黑化大家鼠細胞花鼠細胞家兔細胞昆蟲細胞綠猴細胞馬鐵菊頭蝠細胞綿羊細胞三葉小蹄蝠細胞散鱗鏡鯉細胞社鼠細胞鼠細胞樹鼩細胞團頭魴細胞新生兒細胞新生牛細胞敘利亞倉鼠細胞長尾綠猴細胞中國倉鼠細胞中華鱉細胞棕果蝠細胞腫瘤細胞豬細胞兔細胞犬細胞

抗體庫,小包裝,流式抗體: 脂質(zhì)體2000 11668-019 11668-027 小包裝抗體流式抗體

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人網(wǎng)膜素（Omentin）ELISA檢測試劑盒

時間：2011/12/9閱讀：444

人網(wǎng)膜素（Omentin）ELISA檢測試劑盒使用說明書

人網(wǎng)膜素（Omentin）ELISA檢測試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷

檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被網(wǎng)膜素（Omentin）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的網(wǎng)膜素（Omentin）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法:

1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.細胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品:

1.37℃恒溫箱

2.酶標儀（450nm）

3.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

操作注意事項:

1.試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。

2.實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3.濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。

4.嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 有液體組分使用前充分搖勻。

人網(wǎng)膜素（Omentin）ELISA檢測試劑盒組成:

名稱96孔配置48孔配置備注

微孔酶標板12 孔×8 條12 孔×4 條無

標準品0.3mL*6 管0.3mL*6 管無

樣本稀釋液6mL 3mL 無

檢測抗體-HRP 10mL 5mL 無

20×洗滌緩沖液25mL 15mL 按說明書進行稀釋

底物A 6mL 3mL 無

底物B 6mL 3mL 無

終止液6mL 3mL 無

封板膜2 張2 張無

說明書1 份1 份無

自封袋1 個1 個無

注：標準品（S0-S5）濃度依次為：0、4、8、16、32、64 ng/mL

試劑的準備:20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1:20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

洗板方法:

1.自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

2.手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

操作步驟:

1.從室溫平衡20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

3.樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。

6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min 內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結(jié)果判斷:繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能:

1.準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R 值，大于等于0.9900。

2.靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 ng/mL。

3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4.重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。

6.有效期：6個月

人網(wǎng)膜素（Omentin）ELISA檢測試劑盒

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