慢性阻塞性肺病(COPD)小鼠模型的建模方法

實驗周期：4-6 weeks

建模方法：

主要試劑： 紅金龍香煙（湖北中煙工業(yè)有限責任公司生產，烤煙型，每支含焦油量9mg、煙氣煙堿量0.7mg、煙氣一氧化碳量12mg），脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，美國Sigma公司），TNF-alpha和IL-18 ELISA試劑盒cloud-clone公司）。
建模方式：SPF小鼠，適應性飼養(yǎng)1周，采用鼻腔滴入LPS加熏香煙的方法建立COPD小鼠動物模型分別于第1、29經鼻腔滴入LPS（30μg/6μL），第2-30天（除第29天）采取熏香煙法，將小鼠放入自制的玻璃熏箱，10支/次，30min/次，5d/周，共4周。

模型評價
一般觀察：一般情況空白對照組小鼠無死亡，毛發(fā)光澤，呼吸均勻，活動正常；模型對照組小鼠毛發(fā)無光澤，部分有脫毛現(xiàn)象，躁動，熏煙時喜扎堆，倦怠蜷縮，汗出，腹部脹大，呼吸急促，出現(xiàn)點頭運動，甚者張口呼吸明顯。

小鼠肺功能檢測看小鼠氣道阻力、動態(tài)肺順應性、最大呼氣流量、吸氣時間、呼氣時間、

組織病理學
肺組織形態(tài)學檢測：
腹腔麻醉小鼠后，開胸暴露胸腔：取左側肺葉固定于10%甲醛溶液24h，常規(guī)脫水石蠟包埋，切片行HE染色，光鏡下觀察。
空白對照組小鼠肺泡結構清晰，肺泡大小均勻，氣道黏膜上皮結構完整，纖毛排列整齊；模型對照組小鼠部分肺泡壁塌陷，肺泡不規(guī)則擴大并相互融合，形成肺大泡，肺間質內可見不同程度的炎性細胞浸潤，支氣管黏膜上皮脫落，黏膜皺襞增多，突入管腔，纖毛黏縮，管腔變窄，符合COPD病理改變。

標志因子水平
TNF alpha、Il-18檢測：
最后一次煙熏完后24小時內處死，按0.05mL/10g）腹腔麻醉小鼠，將小鼠腹主動脈取血法取血1mL，室溫下放置2h后，2 000r/min離心20min，取血清，-20℃保存?zhèn)溆?。按ELISA試劑盒操作步驟說明檢測小鼠血清中TNFalpha、