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TMT蛋白組學(xué)
  • TMT蛋白組學(xué)
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更新時(shí)間:2024-09-16 21:00:06

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TMT蛋白組學(xué):帶同位素標(biāo)簽的蛋白組學(xué)技術(shù)(TMT/iTRAQ)是非常重要的蛋白組檢測(cè)手段,通過(guò)對(duì)MS2肽段碎裂得到的報(bào)告基團(tuán)離子強(qiáng)度進(jìn)行計(jì)算獲取肽段的相對(duì)含量值。蛋白組學(xué)研究在生命科學(xué)研究領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用,對(duì)生物樣品蛋白組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,蛋白能否被定量十分重要,尤其是低含量蛋白。研究結(jié)果顯示,TMT定量鑒定會(huì)得到大量的蛋白數(shù)量,并且TMT標(biāo)記更敏感,噪音信號(hào)水平更低。

iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技術(shù)是分別由美國(guó)AB Sciex公司和Thermo公司研發(fā)的多肽體外標(biāo)記定量技術(shù)。不同標(biāo)記試劑與來(lái)源于不同樣品胰酶消化后的肽段結(jié)合,經(jīng)過(guò)色譜分離,并通過(guò)一級(jí)質(zhì)譜和二級(jí)質(zhì)譜。平衡基團(tuán)在二級(jí)質(zhì)譜時(shí)發(fā)生中性丟失,而報(bào)告基團(tuán)在二級(jí)質(zhì)譜低質(zhì)量區(qū)域產(chǎn)生多個(gè)報(bào)告離子,其信號(hào)強(qiáng)度分別代表該標(biāo)記樣品的表達(dá)量,根據(jù)報(bào)告離子的峰面積計(jì)算同一蛋白質(zhì)同肽段在不同樣品間的比值,從而實(shí)現(xiàn)蛋白的相對(duì)和定量。

研究流程:蛋白提取 酶解消化 肽段標(biāo)記 樣本混合 肽段分級(jí) 質(zhì)譜檢測(cè) 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用范圍:
生物醫(yī)學(xué);
基礎(chǔ)研究:生理、病理、藥物作用機(jī)制;
臨床診斷研究:Biomark發(fā)現(xiàn)、藥物篩查;
生命科學(xué)研究;
植物生物學(xué):抗逆脅迫機(jī)制, 生長(zhǎng)發(fā)制, 育種保護(hù)研究等;                            畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,致病機(jī)理研究等;                                          食品營(yíng)養(yǎng):儲(chǔ)藏條件優(yōu)化,品質(zhì)鑒定,安全監(jiān)檢測(cè)等。

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