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阿爾茨海默病動(dòng)物模型
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更新時(shí)間:2024-09-16 21:00:06

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阿爾茨海默病動(dòng)物模型:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一種神經(jīng)退行性疾病,其臨床表現(xiàn)主要是隨著年齡增長,學(xué)習(xí)能力逐漸低下及行為、表達(dá)能力等出現(xiàn)障礙。模擬AD疾病病理發(fā)展的動(dòng)物模型是研究此疾病的必要工具。

動(dòng)物類型:昆明小鼠

造模試劑(1):Aβ25-35

造模方法:小鼠經(jīng)腹腔注射麻醉,固定于腦立體定位儀,暴露前鹵,參照腦立體定位圖譜,每只小鼠右側(cè)腦室注射3μl Aβ25-35(2μg/μl)。坐標(biāo)為前鹵后1.2mm,矢狀縫右側(cè)旁開1.2mm,即為側(cè)腦室的體表部位,進(jìn)針深度為顱骨表面向下3.2mm;注射時(shí)進(jìn)針1μl/min,注射后留針8min,拔針時(shí)速度為1mm/min。

造模試劑(2):AlCl3

造模方法:小鼠右側(cè)腦室內(nèi)注射3μl AlCl3(2.5%),注射坐標(biāo)方法同上。

造模試劑(3):海馬物理損傷

造模方法:小鼠固定于腦立體定位儀,坐標(biāo)為前鹵后2.4mm,矢狀縫右旁開2.0mm,使用自制首端彎曲的9號針頭垂直插入兩側(cè)海馬,順時(shí)針轉(zhuǎn)一周,進(jìn)針深度為顱骨表面向下3mm。

直接購買AD轉(zhuǎn)基因小鼠(4)

轉(zhuǎn)基因模型可分為:APP轉(zhuǎn)基因模型,PS-1轉(zhuǎn)基因模型,ApoE4轉(zhuǎn)基因模型,tau蛋白轉(zhuǎn)基因模型,雙重和三重轉(zhuǎn)基因模型

造模方法:各轉(zhuǎn)基因動(dòng)物AD模型制作方法和原理基本相同,以APP轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型為例:

從人類cDNA文庫可獲取h-APP基因cDNA可表達(dá)片段,在5’端連接合適的啟動(dòng)子,3’端連接SV40及其PolyA尾既構(gòu)成外源h-APP基因。H-APP基因經(jīng)體外擴(kuò)增,裂解純化去除質(zhì)粒序列后,通過一定的方法直接注入小鼠受精卵或早期胚胎細(xì)胞核內(nèi)使之穩(wěn)定地整合于染色體內(nèi),將該受精卵或胚胎細(xì)胞植入假孕母*宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育成熟,即可獲得穩(wěn)定表達(dá)外源h-APP基因的基因鼠。

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