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造模方法:
1,切片,烤片60℃,1h;2,脫蠟及復(fù)水二甲苯10min,100%乙醇5min,95%乙醇5min,90%乙醇5min,85%乙醇5min,80%乙醇5min, 75%乙醇5min,60%乙醇5min,50%乙醇5min,30%乙醇5min,自來水1min;3,1份30%H2O2加10份蒸餾水,室溫10min,蒸餾水洗3次,每次3min;大鼠組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒/大鼠組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因A(MICA)ELISA試劑盒4,微波修復(fù)將切片浸入0.01M枸櫞酸緩沖液,微波中最大火力(98℃-100℃)加熱至沸騰,冷卻(約5-10min),反復(fù)兩次;5,將切片自然冷卻至室溫,PBS洗滌3次,每次5min;6,封閉,5%BSA,室溫20min,甩去多余液體;7,滴加一抗,37℃,1h,或者4℃過夜;8,PBS洗滌3次,每次3min;9,滴加二抗,37℃,15-30min;10,PBS洗滌3次,每次3min;11,滴加SABC,37℃, 30min;12,PBS洗滌3次,每次5min;13,1ml蒸餾水中分別滴加顯色劑,混勻;14,DAB顯色劑配置好后,滴加于切片,室溫,鏡下檢測(cè)反應(yīng)時(shí)間(約5min);15,自來水沖洗干凈,過蒸餾水;16,蘇木素復(fù)染2min,自來水沖洗;17,脫水30%乙醇3min,50%乙醇3min,70%乙醇3min,80%乙醇3min,90%乙醇3min,95%乙醇3min,100%乙醇3min,二甲苯20min;18,樹膠封片,鏡檢。
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