凱式定氮儀的主要應(yīng)用和工作原理

蛋白質(zhì)測(cè)定儀是根據(jù)蛋白質(zhì)中氮的含量恒定的原理，通過測(cè)定樣品中氮的含量從而計(jì)算蛋白質(zhì)含量的儀器。因其蛋白質(zhì)含量測(cè)量計(jì)算的方法叫做凱氏定氮法，故被稱為凱氏定氮儀，又名蛋白質(zhì)測(cè)定儀、粗蛋白測(cè)定儀。該儀器也是食品廠、飲用水廠辦QS、HACCP認(rèn)證中的*檢驗(yàn)設(shè)備。

這里提到的所謂的粗蛋白是: 由于一般蛋白質(zhì)中含氮量約為16%，故在概略分析中，常用凱氏法(Kjeldahl)測(cè)出總氮量，再乘以系數(shù)6.25來(lái)求得。實(shí)際上，它是食品、飼料中含氮化合物的總稱，既包括真蛋白又包括非蛋白含氮化合物，后者又可能包括游離氨基酸、嘌呤、吡啶、尿素、硝酸鹽和氨等。此外，不同蛋白質(zhì)的氨基酸組成不同，其氮含量不同，總氮量換算成蛋白質(zhì)的系數(shù)也不同，如小麥和多數(shù)谷物的換算系數(shù)為5.80，水稻5.95，大豆5.7，多數(shù)食用豆和堅(jiān)果5.3，牛奶6.38等。粗蛋白只是一個(gè)粗略的概。1、粗蛋白的定義是飼料樣品中的氮含量乘以系數(shù)6.25.大多數(shù)蛋白質(zhì)一般都含16%的氮,該系數(shù)即由此推導(dǎo)而來(lái).因此,將飼料中氮的百分含量乘以10016,或者說乘以6.25,就可算出粗蛋白含量。2、測(cè)定的是含氮化合物(其中包括一些非蛋白氮),結(jié)果稱為粗蛋白.本文介紹雙縮脲法測(cè)定飼料的蛋白質(zhì).相對(duì)于凱氏定氮法,該法的優(yōu)點(diǎn)是樣品不需消化處理,結(jié)果為飼料中蛋白質(zhì)的真實(shí)含量,操作簡(jiǎn)單,具有快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。3、測(cè)定的是含氮化合物(其中包括一些非蛋白氮),其結(jié)果只能稱為粗蛋白,而非真蛋白.這與乳粉顆粒大小、結(jié)構(gòu)和密度有關(guān)。 4、因此凱氏定氮法測(cè)得蛋白質(zhì)又稱為粗蛋白.對(duì)于不同的樣品含蛋白質(zhì)類型不同.因此凱氏定氮量換算蛋白質(zhì)時(shí)換算系數(shù)也不一樣。 5、因此求出的蛋白質(zhì)稱為粗蛋白.在普通食品中所說的蛋白質(zhì)均指粗蛋白質(zhì).作者在飼料、牛奶、魚粉分析中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)有摻人尿素等含氮化合物以增加“蛋白”含量。 6、蛋白質(zhì)和氨基酸 測(cè)定食物中的總蛋白質(zhì)(包括小量的非蛋白質(zhì)氮,故又稱為粗蛋白)含量的方法,直到現(xiàn)在用的仍是Kjeldahl在1883年創(chuàng)建的。

它的工作原理是，蛋白質(zhì)測(cè)定儀（俗稱定氮儀）以凱氏定氮法為依據(jù)，進(jìn)行設(shè)計(jì)制造的，此儀器主機(jī)采用蒸氣自動(dòng)控制發(fā)生器，在液位穩(wěn)壓器的配合下，使蒸氣在數(shù)十秒時(shí)間內(nèi)平穩(wěn)輸出供蒸餾器使用。*執(zhí)行機(jī)關(guān)控制下的堿液流經(jīng)蒸餾管進(jìn)入定量消化管，使固定在酸液里的氨在堿性條件下?lián)]發(fā)。第二執(zhí)行機(jī)關(guān)控制下的蒸氣對(duì)堿性條件的試樣再進(jìn)行蒸餾，使氨*揮發(fā)，揮發(fā)的氨被冷凝器冷凝下來(lái)，*地被固定在硼酸之中，然后用標(biāo)準(zhǔn)酸對(duì)其滴定到終點(diǎn)，計(jì)算出氮的含量，再乘以換算蛋白質(zhì)的系數(shù)得出蛋白質(zhì)的含量。

凱式定氮儀的主要應(yīng)用在:蛋白質(zhì)測(cè)定儀用凱氏方法檢測(cè)谷物、食品、飼料、水、土壤、淤泥、沉淀物和化學(xué)品中的氨、蛋白質(zhì)氮含量、酚、揮發(fā)性脂肪酸、氰化物、二氧化硫、乙醇等含量。具有相當(dāng)好的性價(jià)比，僅僅滴定過程需要人工操作一下，非常適合實(shí)驗(yàn)室及檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)常規(guī)檢測(cè)。廣泛用于食品、農(nóng)作物、種子、土壤、肥料等樣品的含氮量或蛋白質(zhì)含量分析。

主要特點(diǎn): 1.內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)的終點(diǎn)顏色判斷自動(dòng)滴定儀 2.蒸餾和指示劑滴定終點(diǎn)顏色判定法的全自動(dòng)控制 3.新發(fā)明的鈦冷凝器保證了儀器的高性能性 。4.全自動(dòng)蒸餾過程，自動(dòng)加堿、加硼酸、加水稀釋、排廢液、滴定、計(jì)算、報(bào)告 。5.可以連接打印機(jī)，PC或鍵盤，按照GLP規(guī)定將數(shù)據(jù)保存。

凱式定氮儀的操作方法：使用全自動(dòng)消化爐和全自動(dòng)凱式定氮儀進(jìn)行蛋白質(zhì)的測(cè)定時(shí)，在加酸量、加催化劑量、消化條件以及蒸餾條件都相同的情況下，較為重要的由人為控制的變量就是取樣量。取樣量不同，可能會(huì)影響消化和蒸餾的結(jié)果。例如，測(cè)定淀粉中的蛋白質(zhì)時(shí)，如果取樣量達(dá)到2.5g左右，則無(wú)法將其消化*；測(cè)定蛋白質(zhì)粉中的蛋白質(zhì)時(shí)，如果取樣量*過0.65g，蒸餾滴定時(shí)則會(huì)因?yàn)槲粘匾好孢^高但氨依然沒有*蒸出而影響較為終的測(cè)定結(jié)果；測(cè)定花粉中的蛋白質(zhì)時(shí)，如果取樣量小于0.2g，則會(huì)因?yàn)闃悠分邪焙窟^少而大量增加滴定相對(duì)誤差。由此可見，在蛋白質(zhì)的測(cè)定中，選取合適的取樣量是非常重要的。