HPLC測定三聚氰胺的分析解決方案

三聚氰胺分析的解決方案

 液相色譜柱：HiSep OTS三聚氰胺分析柱150 mm×4.6 mm i.d., 5 μm（訂貨號：0946150）

 固相萃取柱：HiCapt Melamine(三聚氰胺柱)（60mg/3mL，訂貨號：24-00603 ）

應(yīng)用維泰克科技（武漢）有限公司成功研發(fā)的疏水與強(qiáng)陽離子交換混合模式色譜柱HiSep OTS三聚氰胺分析柱，建立了乳制品中三聚氰胺的快速檢測方法。該方法具有以下特點：

• 操作簡單：不需要離子對試劑，即能分析三聚氰胺
• 成本低廉：全新技術(shù)，使柱平衡時間縮短1/2，試劑成本減少1/2
• 應(yīng)用廣泛：適用于三聚氰胺等極性小分子的分離分析，也可用于LC/MS分析三聚氰胺
• 技術(shù)*：出色的分離能力，即使樣品不做凈化，也能實現(xiàn)三聚氰胺與雜質(zhì)的*分離

1 色譜條件

色譜柱：HiSep OTS三聚氰胺柱; 

流動相：甲醇/5mM乙酸銨（乙酸調(diào)pH3.5）=20/80

(注：5mM醋酸銨的配制方法：稱取乙酸銨0.1927g，加水500mL，用乙酸調(diào)pH至3.5，混勻，備用。)

流速：1.0mL/min；     柱溫：40℃；      進(jìn)樣量：10μL

檢測器：UV/PDA   檢測波長：240nm

2 標(biāo)準(zhǔn)線性

取三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，用流動相稀釋成濃度為0.8μg/mL、2.0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、80μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，分別進(jìn)樣，得到校準(zhǔn)曲線(見圖1)，結(jié)果表明線性良好，相關(guān)系數(shù)為R²= 0.9999。

3  樣品處理及結(jié)果

3.1 國標(biāo)法（參照GB/T 22388-2008）

3.1.1樣品前處理（需SPE凈化）

樣品提?。?/span>

稱取2.0 g試樣，加入20mL三氯乙酸溶液(1%水溶液)和5mL乙腈，渦混，超聲提取15min，5000 r/min離心10 min。取上清液5mL，加入5mL水混勻后作待凈化液。

SPE凈化：

采用HiCapt Melamine(三聚氰胺SPE固相萃取柱)（訂貨號：24-00603），先待凈化液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中。使用前依次用3mL甲醇，5mL水活化，再將待凈化液轉(zhuǎn)移至SPE柱中，控制整個固相萃取過程流速不超過1mL/min，再依次用3mL水和3mL甲醇洗滌，抽至近干，用6mL氨化甲醇溶液洗脫。洗脫液于50℃下用氮氣吹干，殘留物用1mL流動相定容，渦旋混合1min，用0.45μm微孔濾膜過濾后，供HPLC測定。

3.1.2添加回收實驗

稱取空白奶粉2.0g，添加三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，使奶粉中zui終含量為2mg/kg, 其它依照3.1.1進(jìn)行樣本處理，檢測的回收率為95.1%。