2017年ELISA試驗(yàn)原理及ELISA試劑盒質(zhì)量
ELISA試劑盒的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號(hào)。在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)反應(yīng)中,常運(yùn)用ELISA試驗(yàn)來(lái)查看蛋白質(zhì)表達(dá)量或許活性狀態(tài),查看化學(xué)修飾(磷酸化與去磷酸化)。
聯(lián)絡(luò)在固相載體表面的抗原或抗體仍堅(jiān)持其免疫學(xué)活性,酶符號(hào)的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)守時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其間的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗刷的方法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分隔。再參與酶符號(hào)的抗原或抗體,也經(jīng)過(guò)反應(yīng)而聯(lián)絡(luò)在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈必定的比例。參與酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色商品,商品的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接有關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化功率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的成果,使測(cè)定方法抵達(dá)很高的敏感度。
ELISA試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑:(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶符號(hào)的抗原或抗體,稱(chēng)為"聯(lián)絡(luò)物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物。
跟著ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附法技術(shù)的不斷提高,對(duì)ELISA試劑盒的要求和需求也大大提高,高品質(zhì)的ELISA試劑盒源于對(duì)專(zhuān)業(yè)的一向?qū)で?,這正是戶實(shí)人一直在做的。
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