Hu人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ（TNFsR-Ⅱ）

Hu人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)

Mo小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）操作要點(diǎn)1 標(biāo)本的采取和保存 可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、糞便）等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定（如血清、尿液），有些則需經(jīng)預(yù)處理（如糞便和某些分泌物）。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑，而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血kuai收縮后即可取得。除特殊情況外，在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。

Mouse Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody,pANCA ELISA Kit

4 保溫 在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間，這一保溫過(guò)程稱(chēng)為溫育(incubation)，有人稱(chēng)之為孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。 ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì)，只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。

Mo小鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)

大鼠組織蛋白酶K(cath-K)

豌豆凝集素(PSA)

Hu人谷氨酸脫羧酶(GAD)

Hu人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)

Human Anti-glucoprotein 210,GP210 ELISA Kit

植物維生素B12(VB12)

Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISA Kit

Hu人β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）

Hu人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體(Jo1/HRS)

Hu人前列環(huán)素(PGI)

Mouse Fibronectin,FN ELISA Kit

Mo小鼠仙臺(tái)病毒(Sendai)/Sev

大鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)

Rat Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit

ELISA中的試劑（3）－酶的底物3.3 　酶的底物 3.3.1 　HRP的底物 HRP催化過(guò)氧化物的氧化反應(yīng)，代表性的過(guò)氧化物為H2O2，其反應(yīng)式如下：DH2+ H2O2 D+ H2O上式中，DH2為供氧體，H2O2為受氫體。在ELISA中，DH2一般為無(wú)色化合物，經(jīng)酶作用后成為有色的產(chǎn)物，以便作比色測(cè)定。常用的供氫體有鄰苯二胺(O-phenylenediamine, OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, TMB)和ABTS[2,2'-azino-di-(3- ethylbenziazobine sulfonate-6)]。