國產(chǎn)液相色譜柱如何沖洗你知道么

來源：上海通微分析技術(shù)有限公司 2018年07月23日 17:36

　　國產(chǎn)液相色譜柱如何沖洗你知道么

　　我們首先預(yù)熱下國產(chǎn)液相色譜柱的相關(guān)參數(shù)：

　　1.表面積

　　顆粒外表面和內(nèi)部孔表面的總和，以m2/gram表示。

　　高表面積對于多組份樣品的分離具有較強(qiáng)的保留能力，柱容量和分離度。表面積低的填料通常能迅速達(dá)到平衡狀態(tài)，對于梯度淋洗尤為重要。

　　2.孔徑

　　顆粒的孔或腔的平均尺寸，范圍60-10,000Å。

　　大孔的填料顆粒可以延長溶質(zhì)大分子在填料表面滯留的時間，達(dá)到充分分離，改善峰形；樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑，樣品MW＞4000選擇300Å的孔徑。

　　3.碳覆蓋率

　　對液相色譜分離的影響，與基體物質(zhì)相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率可以提高分辨率，分析時間長。低碳覆蓋率縮短運(yùn)行時間。

　　4.封端/封尾

　　封端對色譜分離的影響，使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基（二次鍵合）。封端就是減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象，對于極性樣品，未封端與經(jīng)過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異。

　　5.粒徑

　　1.8um-3.5um便于快速分離，5um是行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，7um是制備柱。

　　如何沖洗液相色譜柱呢？

　　1.對于反相色譜柱的沖洗

　　用以下溶劑至少各25mL沖洗色譜柱(分析柱)：

不含緩沖鹽的流動相、100%甲醇、100%乙腈、75%乙腈+25%異丙醇、100%異丙醇、100%二氯甲烷、100%己烷。注意若使用己烷或二氯甲烷沖洗色譜柱，則在重新使用反相流動相以前，必須用異丙醇沖洗色譜柱。

　　2.對于正相色譜柱的沖洗

　　用以下溶劑至少各50mL沖洗色譜柱(分析柱)：50%甲醇+50%CH4CL3、100%乙酸乙酯。

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