小鼠elisa試劑盒分別用"陽性"、"陰性"標明。"陽性"標明該標本在該測定系統(tǒng)中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判別法也可得到半定量效果,即用滴度來標明反應的強度,其實質(zhì)仍是一個定性實驗。
a.陽性判定值
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判別效果陽性或陰性的標準。
陽性判定值=NCX+0.05
標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應留心的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
根據(jù)以上敘說可以看出,ELISA試劑盒在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到實驗的質(zhì)控效果,試劑蛻變和操作不當均會發(fā)作"實驗無效"的結(jié)果。
.標本/陰性對照比值
在實驗條件(包括試劑)較難保證安穩(wěn)的情況下,這種判別法較為適宜。在得出標本(S)和陰對 照(N)的A值后,核算S/N值。也有寫作P/N的,這兒的P不代表陽性(positive),而是患者(patient)的縮寫,不應誤解。為防止混雜,更宜用S/N標明。在前期的間接法ELISA中,有些作 者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的S/N 的閾值。更應留心的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。
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