蒸發(fā)光散射檢測器ELSD檢測三金片中羥基積雪草苷成分含量

三金片（測試物質(zhì)：羥基積雪草苷）

三金片

Sanjin Pi an

【處方】金櫻根     菝葜

羊開口     金沙藤

積雪草

【制法】以上五味，加水煎煮二次，次2小時，第二次1小時，煎液濾過，濾液合并，濃縮至適量，噴霧干燥，加人輔料適量，混勻，制成顆粒，干燥，壓制成1000片（小片）或 600片（大片），包糖衣或薄膜衣，即得。

【性狀】本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯棕色 至黑褐色;味酸、澀、微苦。

【鑒別】（1)取本品15片(小片）或10片（大片），除去包衣，研細,加乙醇15ml,超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加0. 01mol/L氫氧化鈉溶液20ml,微熱使溶解，用乙mi10ml振搖提取，棄去乙mi液,水溶液備用，乙酸乙酯10ml振搖提取，水溶液備用；乙酸乙酯液濃縮至1ml，作為供試品溶液。 另取金櫻根對照藥材2. 5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氣甲烷-甲醇(17 : 3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色 淸晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯兩個或兩個以上相同顏色的主斑點。

（2）取〔鑒別〕（1)項下的備用水溶液，用水飽和的正丁醇15ml振搖提取，分取正丁醇液，用正丁醇飽和的水5ml洗滌， 棄去水洗液,正丁醇液蒸干，殘淹加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取積雪草苷對照品，加甲醇制成每1ml含1mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗， 吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上， 以三氯甲烷-甲醇-水（7 : 3 ：0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%疏酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色淸晰。供試品 色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

（3）取本品10片（小片）或6片（大片），除去包衣，研細，加乙酵50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液加鹽酸5ml，加熱 回流2小時，放冷，用40%氫氧化鈉溶液調(diào)至中性，蒸至無醇味，殘渣用熱水40ml溶解，用二氯甲烷振搖提取2次(40ml， 30ml)，合并二氯甲烷提取液，蒸干，殘渣加甲酵1ml使溶解，作為供試品溶液。另取菝葜對照藥材5g，同法制成對照藥材溶液。再取薯蕷皂苷元對照品，加甲酵制成每1ml含 0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則 0502)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯（4 ：1）為展開劑，展開，取出， 晾干，噴以10%硫酸乙醉溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365mn)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯兩個或兩個以上相同顏色的熒光斑點;在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

（4）取本品15片（小片）或10片（大片），研細，加甲醉 100ml,超聲處理20分鐘，濾過，濾液濃縮至約10ml,加在中 性氧化鋁柱（100?200目，5g,內(nèi)徑為1cm)上，用甲醇50ml 洗脫,收集流出液與洗脫液，蒸干，殘渣用水20ml溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次15ml,合并乙酸乙酯提取液，蒸干，殘渣加甲醉lml使溶解，作為供試品溶液。另取羊開口對照藥材5g，加水100ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇20ml,同法制成對

照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5?10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氣甲烷-丙酮-水(6 : 14 : 1)為展開劑， 展開，取出，晾干，置紫外光燈（365mn)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。

【檢査】應符合片劑項下有關的各項規(guī)定。

【含量測定】照液相色譜法測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲酵-水(48: 52)為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測(漂移管溫度：70度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)。理論板數(shù)按羥基積雪草苷峰計算應不低于2000。

sanotac ELSD9000 蒸發(fā)光散射檢測器

對照品溶液的制備  分別取羥基積雪草苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液和每1lml含0.6mg的溶液，即得。

供試品溶液的制備  取本品30片（小片）或20片（大片），除去包衣，精密稱定，研細，取約1.5g，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重董，超聲處理（功率250W,頻率40kHz) 45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醉補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，回收溶劑至干，殘渣加水20ml使 溶解，用水飽和的正丁酵振搖提取3次，每次15ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌2次，每次15ml,取正丁醇液，減壓回收溶劑至干，殘淹用甲醇溶解，轉移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測定法  分別精密吸取上述兩種濃度的對照品溶液各 10μ1與供試品溶液5?10μl,注人液相色譜儀，測定，用外標 兩點法對數(shù)方程計算，即得。

本品每片含積雪蘋以羥基積雪草苷(C₄₈H₇₈O₂₀）計，小片不得0. 22mg;大片不得少于0. 35mg。

【功能與主治】清熱解毒，利濕通淋，益腎。用于下焦?jié)駸崴碌臒崃?、小便短赤、淋瀝澀痛、尿急頻數(shù);急慢性腎盂腎炎、膀胱炎、尿路感染見上述證候者。

【用法與用量】口服。小片一次5片，大片一次3片，一 日3?4次。

【規(guī)格】（1)薄膜衣小片每片重0. 18g(相當于飲片1g)

薄膜衣大片每片重0.29g(相當于飲片3.5g)

糖衣小片片心重0.17g(相當于飲片2. 1g)

糖衣大片片心重0.28g(相當于飲片3.5g)

【貯藏】密封。