液相色譜+蒸發(fā)光散射檢測器方法檢測桔梗冬花片中桔梗皂苷D

桔梗冬花片（測試物質(zhì)：桔梗皂苷D  ）

桔梗冬花片

Jiegeng Donghua Pian

【處方】桔梗300g        款冬花37g 制遠志63g          甘草20g

【制法】以上四味，桔梗150g粉碎成細粉，剩余桔梗與款冬花、制遠志、甘草加水煎煮三次，每次2小時，煎液濾過， 合并濾液，靜置，取上淸液濃縮成稠膏，加入桔梗細粉，混勻，干燥，研細，制成顆粒，干燥，或加人硬脂酸鎂適量，壓制成 1000片，包糖衣或薄膜衣，即得，

【性狀】本品為糖衣片或薄膜衣片，除去包衣后顯棕色 至棕褐色（味微甜。

【蘧別】（1)取本品，置顯撤鏡下觀察：聯(lián)結(jié)乳管直徑14?25μm，含淡黃色顆粒狀物（桔梗）。

(2)取本品5片，除去包衣，研細，加乙酵30ml,加熱回流 1小時，放冷，濾過，濾液回收溶劑至干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇提取液，回收溶劑至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取桔梗對照藥材1g,加乙醇20ml,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取上述兩種溶液各10μl,分別點于同一桂膠H薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯甲酸(5:5 :0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醉溶液，在105℃加熱至斑點顯色淸晰，日光下檢視。 供試品色請中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顔色的主斑點。

（3）取本品20片，除去包衣，研細,加乙醉50ml,冷浸1小 時后，超聲處理30分鐘，濾過，濾液揮千，殘渣加乙酸乙酯 0. 5ml使溶解，作為供試品溶液。另取款冬花對照藥材0. 5g， 同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502>試驗，吸 取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60?90℃）-丙酮（4 ： 1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色淸晰，日光下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

（4）取本品10片，除去包衣，研細，加三氯甲烷50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取遠志對照藥材0.5g,加三氣甲 烷20ml,同法制成對照藥材溶液，照薄層色譜法（通則0502) 試驗，吸取供試品溶液20μl、對照藥材溶液5μl，分別點于同一 硅膠G薄層板上，以石油醚（60?90℃)-丙酮（4 :1）為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365mn)下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顔色的熒光斑點。

（5）取本品20片，除去包衣，研細，加甲醇50ml,加熱回流30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘渣加水30ml使溶解，用乙酸乙酯振搖提取2次，每次30ml，合并乙酸乙釀提取液， 回收溶劑至干，殘渣加乙酸乙釀lml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.5g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取供試品溶液15μl、對照藥材溶液5μl,分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-異丙酵 (10 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，在紫外光（365nm)下檢 視,供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同 顏色的熒光主斑點，再噴以8%香草醛乙醇溶液和硫酸溶液 (7→10)的混合溶液（0.5 :5),在105℃加熱至斑點顯色淸晰，在日光下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的主斑點。

【檢査】應符合片劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。

【正丁醇浸出物】取本品30片，除去包衣，梢密稱定，研細，取適量（約10片的重量），精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加入甲醇100ml,稱定重量，加熱回流提取1小時，放冷，再稱定重童，用甲醇補足減失的重置，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml,回收溶劑至干，殘渣加水30ml使溶解，用乙mi振搖提 取3次，每次30ml，棄去乙mi液，再用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，在105C干燥3小時,移置干燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，即得。

本品每片含正丁醇浸出物不得少于8. 0mg。

【含置獼定】桔根  照液相色譜法測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-水（26:70）為流動相；蒸發(fā)光散射檢測器檢測(漂移管溫度：65度，氣體流速3l/min，氣體壓力：3.8bar)。理論板數(shù)按桔梗皂苷D峰計算應不低于3000。

ELSD9000 蒸發(fā)光散射檢測器

對照品溶液的制備  取枯梗皂苷D對照品適精密稱 定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得，

供試品溶液的制備  取本品20片，除去包衣，稱密稱定，研細，取約2g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50ml,稱定重量，超聲處理（功率250W,頻率40kH*)30分鐘，放冷，用50%甲醇補足減失的重釐，搖勻，濾過，精密量取續(xù)滹液25ml，回收溶劑至干，殘渣加水20ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml,合并正丁醇提取液，用氨試液50ml洗滌，棄去氨液，正丁醇液回收溶劑至干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)浦液，即得。

測定法  精密吸取對照品溶液5μl、10μl供試品溶液各 10?15μl,注入液相色譜儀，測定，用外標兩點法對數(shù)方程計算，即得.

本品每片含桔梗以枯梗皂苷D(C₅₇H₉₂O₂₈)計，不得少于0. 22mg。

甘草  照液相色譜法測定。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗  以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑>以甲辭-水-冰醱酸-三乙胺（65:35 : 1:0.3)為流動相 ，檢測波長為250nms理論板數(shù)按甘草酸峰計算應不低于 2500。

對照品溶液的制備  取甘蘋酸銨對照品適量，精密稱定， 加50%甲諄制成每1ml含40μg的溶液，即得（甘蘋酸的重量=甘蘋酸銨的重量/I. 0207〉。

供試品溶液的制備  取本品10片，除去包衣，梢密稱定，研細，取約0.5g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50% 甲醇25ml,稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用50%甲醉補足減失的重，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

測定法  精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl,注入液相色譜儀，測定，即得。

本品每片含甘草以甘草酸（C₄₂ H₆₂ 0₁₁ )計，不得少于 0. 30mg,

【功能與主治】止咳祛痰。用于痰濁阻肺所致的咳嗽痰多；支氣管炎見上述證候者。

【用法與用量】口服，一次6?8片，一日3次。

【規(guī)格】薄膜衣片每片重0.25g。

【貯藏】密封。