EA50染色液的檢驗(yàn)方法
1、將涂片置于95%乙醇中固定5分鐘以上,視細(xì)胞涂層的厚薄及雜質(zhì)的多少,可適當(dāng)延長時(shí)間;
2、取出,依次浸入80%、50%的乙醇中各約30秒,然后用蒸餾水潤洗;
3、用蘇木素染液(A液)染8-14分鐘,直到染色明顯為止后,(染色時(shí)間長短,依據(jù)染色液中的乙醇揮發(fā)程度及染色液染片數(shù)量和診斷醫(yī)生判讀標(biāo)準(zhǔn)而定;同時(shí)室內(nèi)溫度對(duì)染色效果及時(shí)間也有一定的影響。)取出后,用蒸餾水沖洗,除凈多余的染液;
4、用0.5~1%鹽酸乙醇分化數(shù)秒(使細(xì)胞片呈淡橙紅色);再置于稀碳酸鋰溶液中反藍(lán)約30秒,使細(xì)胞片呈藍(lán)色或紫藍(lán)色,然后用蒸餾水沖洗;
5、依次放入50%、80%的乙醇中各30秒,放入95%乙醇中脫水2分鐘;
6、用橘黃G染液(B液)染色1-2分鐘,取出,用95%乙醇清洗2次;
7、在95%乙醇中脫水2分鐘;
8、用EA50染液(C液)染6-8分鐘,取出于95%乙醇中洗兩次,各1分鐘;
9、用無水乙醇脫水,二甲苯中浸泡透吸1-2分鐘,使細(xì)胞及細(xì)胞核透明,然后用中性樹膠等封片劑和蓋玻片封固,后鏡檢。
檢驗(yàn)結(jié)果的解釋:脫落細(xì)胞染色后,細(xì)胞核呈紫色,非角質(zhì)化細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈藍(lán)色或淡綠色,角質(zhì)化細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色或橘紅色。粘液呈淡藍(lán)色或粉紅色。
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