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液相色譜儀使用及工作原理

來(lái)源:網(wǎng)絡(luò)   2019年11月12日 09:26  

工作原理:

流動(dòng)相通過(guò)輸液泵流經(jīng)進(jìn)樣閥,與樣品溶液混合,流經(jīng)色譜柱,在色譜柱中進(jìn)行吸附、分離,后每一組分分別經(jīng)過(guò)檢測(cè)器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娪嵦?hào),在色譜工作站上出現(xiàn)相應(yīng)的樣品峰。

液相色譜的使用:

首先對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,然后進(jìn)樣,進(jìn)樣完畢后,清洗進(jìn)樣口,每次分析結(jié)束后,清洗通道,后關(guān)閉儀器。擴(kuò)展資料:
液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動(dòng)相,而液體和氣體的性質(zhì)不相同。
此外,液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。
主要有以下幾力‘面:
①操作條件及應(yīng)用范圍不同
對(duì)于氣相色譜,是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì),對(duì)高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難,致使其應(yīng)用受到一定程度的限制,據(jù)統(tǒng)計(jì)只有大約20%的機(jī)物能用氣相色譜分析。
而液相色譜是常溫操作,不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制,它非常適合相對(duì)分子量較大,難汽化,不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析,大約占有機(jī)物的70%~80%。
②液相色譜能完成難度較高的分離工作
a.氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的,基本不參與分配平衡過(guò)程,與樣品分子無(wú)親和作用,樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動(dòng)相液體也與固定相爭(zhēng)奪樣品分子,為提高選擇性增加了一個(gè)因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動(dòng)相,增加分離的選擇性。
b.液相色譜固定相類(lèi)型多,如離子交換色譜和排阻色譜等,作為分析時(shí),選擇余地大;而氣相色譜并不可能。
c.液相色譜通常在室溫下操作,較低的溫度,一般有利于色譜分離條件的選擇。
③由于液體的擴(kuò)散性比氣體的小105倍,因此,溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢,柱外效應(yīng)就顯得特別重要;而在氣相色譜中,由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。
④液相色譜中,制備樣品簡(jiǎn)單,回收樣品也比較容易,而且回收是定量的,適合于大量制備,但液相色譜尚缺乏通用的檢測(cè)器,一起比較復(fù)雜,價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中,這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的。
綜上所述,液相色譜具有柱效高,選擇性高,靈敏性高,分析速度快,重復(fù)性好,應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一。目前在化學(xué),化工,醫(yī)藥,生化,環(huán)保,農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。
液相色譜應(yīng)用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
(1)分離混合物
液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類(lèi)繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
通過(guò)與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,可分離并同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì),能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展,還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對(duì)其的分離。
(2)生化分析
由于液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域,并已成為解決生化分析問(wèn)題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用
液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等:液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類(lèi)等.使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

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