化學發(fā)光技術

放射免疫分析法有很高的靈敏度，但存在著放射性防護和同位素污染等問題。近年來，許多非放射性同位素標記的免疫分析方法相繼出現。其中，在化學發(fā)光反應及抗原-抗體特異性識別基礎上建立起來的一種新的非放射免疫分析技術--化學發(fā)光免疫分析法，由于這種方法具有靈敏度高，特異性強，精密度好，線性范圍寬，儀器設備簡單，試劑價格低廉，方法穩(wěn)定、快速等優(yōu)點，已成為一種重要的非同位素標記免疫學檢測方法。

把化學發(fā)光物質與免疫學反應結合起來，用光反應表現被測的免疫成分濃度，即把高靈敏的光反應與特異性的免疫學反應相結合的方法，稱為化學發(fā)光免疫分析技術。

化學發(fā)光技術是將發(fā)光物質（如吖啶酯、魯米諾等）標記抗原或抗體進行反應，發(fā)光物質在反應劑（如過氧化陰離子）激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體，當激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時發(fā)射出光子，用自動發(fā)光分析儀接收光信號，測定光子產量，以反映待檢樣品中抗體或抗原含量?；瘜W發(fā)光免疫分析方法的檢測靈敏度要遠遠高于ELISA、熒光免疫等，而優(yōu)于或與同位素檢測相當；在使用方便性上，化學發(fā)光與傳統(tǒng)ELISA方法一樣簡單易用；在對人體和環(huán)境的危害上，化學發(fā)光對此沒有任何擔憂。

目前，越來越多的免疫檢測項目通過化學發(fā)光免疫檢測來進行，以代替?zhèn)鹘y(tǒng)的ELISA和放射免疫分析法。

化學發(fā)光免疫分析包括三大類型：標記化學發(fā)光物質的化學發(fā)光免疫分析、標記熒光物質的熒光化學發(fā)光免疫分析和標記酶的化學發(fā)光酶聯免疫分析。

zui近的一些分子生物學進展使得一些生物技術工具極大提高了生物發(fā)光和化學發(fā)光的檢測和快速應用。生物發(fā)光和化學發(fā)光（BL／CL）的主要特點就在于發(fā)光信號的高度可測性，可以用PMT（光電倍增管）和CCD成像系統(tǒng)來檢測極少量的光子信號。BL是屬于CL范疇之內，CL反應的特點是高光子產生效率，BL為0．5～0．8，CL為0．1-0．001。因此BL／CL的檢測極限可以達到10-21～10-18mol，這顯然要比其他的光學技術強得多。BL／CL已經廣泛的應用到免疫檢測中進行標記物的超靈敏檢測。

CL免疫檢測不但可以通過以CL分子直接標記抗原或抗體，也可以以CL底物標記可被檢測的酶。相比同位素檢測，CL檢測以其更加靈敏和可檢測性獲得越來越多的應用。