近年來,由深圳市耐思特科學(xué)儀器有限公司研發(fā)人員對發(fā)光細(xì)菌的研究和應(yīng)用做了大量的工作,成功研制出了水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀綜合水體毒性的測試儀器,并建立了發(fā)光細(xì)菌法生物毒性測試系統(tǒng),為發(fā)光細(xì)菌毒性檢測技術(shù)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。
水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀檢測技術(shù)是建立在細(xì)菌發(fā)光生物傳感方法基礎(chǔ)上的毒性檢測技術(shù),利用靈敏的光電測量系統(tǒng)測定毒物對發(fā)光細(xì)菌發(fā)光強(qiáng)度的影響,能有效地檢測突發(fā)性或破壞性的環(huán)境污染。有毒的化學(xué) 物質(zhì)、重金屬離子、抗生素、化學(xué)治療劑、農(nóng)藥等污染物質(zhì)都會影響細(xì)菌發(fā)光,所以可以用發(fā)光細(xì)菌作為敏 感的指示物,測定有毒物質(zhì)。
這類物質(zhì)抑制細(xì)菌發(fā)光的途徑有兩個:一是直接抑制參與發(fā)光反應(yīng)的酶類活性;另一是抑制細(xì)胞內(nèi)與發(fā)光反應(yīng)有關(guān)的代謝過程。 因此,能夠干擾或破壞發(fā)光細(xì)菌呼吸、生長、新陳代謝等生理過程的任何有毒物質(zhì)都可以根據(jù)發(fā)光程度的根據(jù)測定結(jié)果判定毒性待測樣品急性毒性的大小,其判定標(biāo)準(zhǔn)有3個:
①有毒、無毒;
②百分?jǐn)?shù)等級;
③對數(shù)等級。
國內(nèi)水質(zhì)急性生物毒性在線分析儀多釆用百分?jǐn)?shù)等級,百分?jǐn)?shù)等級可 根據(jù)相對發(fā)光率的大小及等當(dāng)量HgCL溶液濃度判定 待測樣品的毒性大小,也可以用EGo判定待測樣品的毒性大小,具體如表1、表2所示。
表1相對發(fā)光率毒性百分?jǐn)?shù)毒性等級變化測定。
一、基于細(xì)菌發(fā)光法的快速水質(zhì)毒性分析儀
1.水質(zhì)毒性的評定指標(biāo)
發(fā)光細(xì)菌毒性通常以相對發(fā)光率、相對抑光率、
ECjo表達(dá),其表達(dá)公式如下:
相對發(fā)光率=
樣品光強(qiáng)度 對照光強(qiáng)度
xlOO%
相對抑光率=
對照光強(qiáng)度-樣品光強(qiáng)度
對照光強(qiáng)度
xlOO%
ECjo為相對抑光率達(dá)到50%時(shí)的樣品濃度(或稀 釋度)。
2.水質(zhì)毒性分析儀的分析方法及原理
本文以在線監(jiān)測儀為例,儀器主要有發(fā)光細(xì)菌培養(yǎng)裝置、光電檢測裝置、數(shù)據(jù)處理部分及數(shù)據(jù)顯示部分。分析方法是先將某種發(fā)光細(xì)菌凍干粉在配置好的營養(yǎng)液中活化,活化時(shí)間因細(xì)菌不同而不同。通常儀器有兩個檢測 通道,一路用于檢測空白對照樣品,另一路檢測被測樣 品。兩路同時(shí)與培養(yǎng)好的發(fā)光細(xì)菌混合,通過生物發(fā)光檢測裝置分別測量出發(fā)光強(qiáng)度值和7,,這樣就可 以計(jì)算樣品的相對抑光率(H)和相對發(fā)光率(£):
H(%)=(l-#)xl00%
£(%)=-^-xl00%
A)
需要注意的是,對照樣和待測樣所加入的發(fā)光細(xì) 菌液一定要等量,測量溫度要保持一致,如果測定包 括pH值影響在內(nèi)的急性毒性,不應(yīng)調(diào)節(jié)水樣pH值。 如果要測定排除pH值影響在內(nèi)的急性毒性,需將對 照樣品pH值調(diào)節(jié)到與待測樣品一致。
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