程序降溫儀分類和使用步驟介紹

 　　程序控制冷凍裝置俗稱：程序降溫儀，也稱為程序冷凍儀、胚胎冷凍儀、細(xì)胞冷凍儀、程控降溫儀；廣泛用于凍存細(xì)胞、胚胎等。采用微機(jī)控制技術(shù)，軟件，能較準(zhǔn)確地控制液氮的施放量，從而保證被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍。該儀器具有操作簡便、人機(jī)界面清楚。

　　程序降溫儀是實(shí)現(xiàn)生物材料深低溫保存的關(guān)鍵設(shè)備，根據(jù)降溫及控制原理不同，可以將其分為兩類：①液氮噴射式降溫儀。②升降式降溫儀。它們均以液氮為制冷源。程序降溫儀主要由冷卻室、低溫電磁閥、風(fēng)扇、溫度傳感器、放大電路、微處理機(jī)和液氮容器組成。

　　液氮噴射式降溫儀適合較大容積樣本的降溫保存，優(yōu)點(diǎn)在于控溫好，受外界環(huán)境干擾小，但是其價(jià)格昂貴，液氮消耗量大，液氮中如有少量水分就會(huì)造成輸送管道堵塞和低溫電磁閥失靈。

　　升降式降溫儀由液氮容器、步進(jìn)機(jī)、微機(jī)控制系統(tǒng)和記錄儀組成。它是利用液氮的自然蒸發(fā)在杜瓦瓶頸部所形成的溫場（0~-196℃），由步進(jìn)機(jī)根據(jù)預(yù)先設(shè)定的降溫、復(fù)溫程序控制生物標(biāo)本在此溫度區(qū)內(nèi)上下移動(dòng)的速率，來控制標(biāo)本的溫度和降溫速率。

　　程序降溫儀步驟：

　　(1)冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

　　(2)配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

　　(3)離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

　　(4)取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1～2ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。