RENJIEBIO:教您血清、血漿如何分離

RENJIBIO:教您血清、血漿如何分離

血清制備方法：

使用無熱原無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液樣本，將試管或離心管在室內(nèi)溫度下放置自然凝固（視室溫環(huán)境10分鐘到2小時不等）或4℃過夜，分離出血清，（建議傾斜試管或離心管以擴(kuò)大液面的橫截面，使血清能更大程度的分離出來，），2-6℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，立即進(jìn)行測定，建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

血漿制備方法:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉、枸櫞酸納或檸檬酸鈉作為抗凝劑，使用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液樣本，采集后30分鐘內(nèi)，混合10-20分鐘后，2-6℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清液（血漿），建議在-20℃或-80℃下將收集的血清分裝保存，避免反復(fù)凍融。樣本應(yīng)避免溶血或高血脂。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

血清、血漿分離的注意事項:

血清、血漿分離過程中特別需要注意兩點：防止溶血和細(xì)胞混入。

1.快：血液環(huán)境的穩(wěn)定性與保存時間的長短呈反比，細(xì)胞膜的穩(wěn)定性也在下降，在這種情況下，應(yīng)盡快開展血清、血漿的分離，并嚴(yán)格按照操作說明進(jìn)行，避免出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，血清、血漿分離后務(wù)必避免反復(fù)凍融。

2.慢：離心速度不能過快，過快的離心速度會造成紅細(xì)胞壓積，容易產(chǎn)生溶血。

3.冷：血液樣品如不能馬上進(jìn)行血清或血漿的分離，則盡量冷藏保存和運(yùn)輸，但是，不能冷凍，否則血細(xì)胞會形成冰晶造成細(xì)胞破裂而溶血。

RENJIEBIO小知識：
1.抗凝劑選擇：不同的抗凝劑有其不同的分子構(gòu)型，會對血液中各細(xì)胞的細(xì)胞膜產(chǎn)生不同的作用，有的會增加細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，有的會降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性，所以選擇一款合適的抗凝劑至關(guān)重要（檢測前請仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說明書，查看該試劑盒針對抗凝劑是否有特殊要求）。

2.樣品處理不當(dāng)?shù)奈：Γ貉捍娣胚^程中溫度過高或反復(fù)凍融對細(xì)胞膜有很大的損害。溫度過高及反復(fù)凍融會使細(xì)胞膜上的結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)象發(fā)生改變，進(jìn)而造成細(xì)胞膜的彈性降低以致破解產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，所以用于分離血清、血漿的血液應(yīng)避免反復(fù)凍融。

血清質(zhì)量是怎樣影響檢測的？

1. 溶血：紅細(xì)胞的破裂會引起血漿成分的改變，對一些生化項目如谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、鉀的測定結(jié)果造成較大的影響。若進(jìn)行抗體類檢測本身血清的顏色會干擾到終的酶標(biāo)儀讀數(shù)。

2. 脂血：在運(yùn)用比色法和比濁法檢測的項目中，脂血中的乳糜微粒具有散射光的特性不能通過雙波長進(jìn)行消除從而影響檢測結(jié)果。

3. 黃疸：黃疸的血清中含有膽紅素，若樣本放置時間過長或通過氧化劑后膽紅素還可被氧化為膽綠素、膽褐素，這些色素在不同波長范圍具有一定的光吸收，從而影響檢驗結(jié)果。

常見的血液生化指標(biāo)與激素

常見的血液生化指標(biāo)：血糖(GLU)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、肌酐(Crc)、尿素氮(BUN)、膽固醇(CHO)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、鎂、鈣等。

常見的激素：睪酮(T)、孕酮(P)、雌二醇(E2)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)、游離三碘甲腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)等。