動物疫病檢測方法

動物疫病檢測方法：

【為何要做實驗室檢測】

如今豬場現(xiàn)場疫病的狀況越來越復雜化，單感染的，共感染的，繼發(fā)感染的，情況各不相同；同時多種疾病有相似的臨床表現(xiàn)，比如，同是母豬發(fā)生流產(chǎn)，有可能是PRRSV，PRV，CSFV，但是其實JEV，PCV2等病原都有可能引起繁殖障礙，甚至有些時候引起流產(chǎn)的并不是病原感染而是應激、中毒等非傳染性因素；此外，隨著一些疾病疫苗免疫的普遍，毒株致病性的減弱，在感染后出現(xiàn)亞臨床感染幾率增多，當年臨床老司機們想要僅憑著一把手術(shù)刀(有時其實是殺豬刀），一雙眼睛就叱咤風云豬群間已經(jīng)越來越難了，只能感慨“看不懂”，這病越來越不按教科書那樣得了。還得依靠天眼--—實驗室各種儀器設備和實驗方法來甄別，為各個病原了斷清白，爭取做到不放過一個壞人，也不錯怪一個好人。

 診斷的結(jié)果往往可以用來參考是否需要調(diào)整飼料，是采取閉群、淘汰、還是可以引種了，同時確定是疫苗全群免疫還是只做后備馴化，其效果如何；何時需要做抗生素保健。

具體怎么做實驗室診斷和監(jiān)測呢？今天先聊一聊血清學的檢測技術(shù)。

　　【血清學檢測技術(shù)】

　　血清學檢測技術(shù)大部分的都是用的抗原抗體間的特異性結(jié)合特性來檢測血清中的某種病原的抗體。常見的抗體檢測機技術(shù)包括：

　　酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）

　　膠體金試紙條

　　間接免疫熒光（IFA）

　　血凝血抑實驗（HA & HI )

　　病毒中和實驗（VN）

　　免疫電泳（敏感度太低，操作麻煩）

　　血清學檢測界一姐”ELSIA“（伊萊挲，與日本藝人”野田繪理紗“同名----不搜不識啊，上次Boss Yang相聲輔修專業(yè)學生寒同學被實驗暴虐后揚言要給未來的女兒取名ELISA，看樣子還挺洋氣），無論檢測疫病種類還是單品使用率都是，今天先著重講講她。基本原理是將抗原（病毒細菌等病原成分）或者抗體結(jié)合在固相載體（聚苯乙烯）上利用抗原抗體結(jié)合專一性進行免疫反應的定性和定量檢測方法。通俗點說就是利用抗原抗體特異性結(jié)合將酶掛到板子上，然后催化底物反應顯色，根據(jù)顯色的深淺，判斷酶的多少，間接反應有沒有或者有多少抗體（或抗原）加進去并吸附上了。大的特點是既可以檢有沒有（定性），也可以檢有多少（定量）。

　　根據(jù)抗原抗體的排列組合方式可以分成以下幾種：

　　直接法：直接酶標一抗，簡單粗暴，相對操作簡便，加樣次數(shù)少，只有一次抗原抗體反應，貌似包誰檢誰都不太方便，所有一抗做標記，不是都能標，而且貴。

　　間接法：原理簡單，易懂，豬病檢測上，一般先包被病原的某個抗原或者全病毒，然后加入豬的待檢血清（一抗）然后用其他動物（一般是羊）抗豬酶標記抗體加上去催化底物。（PRRSV抗體檢測就用該方法）

　　夾心法：多用于抗原檢測，包被抗體，然后加入待檢的樣品（含病毒或其他微生物或相應的成分），再加另外一個抗體（可是單抗也可是多抗）后再加異源動物的酶標二抗來催化底物。優(yōu)勢：高靈敏、高專一性，抗原無須事先純化。缺點：抗原一定得擁有兩個以上的抗體結(jié)合部位。

　　競爭法：競爭法一般用于檢測無法同時與兩種抗體結(jié)合的小分子抗原。優(yōu)勢：可適用比較不純的樣本，而且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。缺點：整體的敏感性和專一性都較差。

　　常見豬病的檢測靶標：

　　上面列的其實也就是豬場常規(guī)檢測的老三項+口蹄疫的附加項。具體要求每個方面的檢測數(shù)據(jù)如何解讀，等后面聊案例的時候再做詳細解答。

　　后附上硬通貨：

CSY-E96D動物疾病快速診斷儀采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法；可定量快速畜牧類疾病診斷如禽流感、豬瘟、豬藍耳、偽狂犬等疾病，廣泛應用于養(yǎng)殖場、屠宰場、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗檢疫單位使用。

技術(shù)參數(shù)：

☆波長范圍:300nm-1000nm

☆波長準確度:±2nm

☆吸光度范圍: 0.000~4.000ABS

☆分辨率 :0.001Abs

☆穩(wěn)定性 : ±0.001A/hr

☆透射比重復性: ≤0.5%T

☆光源 : 進口LED

☆樣品池 : 微孔板