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液相色譜柱在選購(gòu)時(shí)需注意哪些問(wèn)題？
液相色譜柱在選購(gòu)時(shí)需注意哪些問(wèn)題？
在選擇色譜柱之前，多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類(lèi)型結(jié)構(gòu)、性、酸堿性、分子量大小等等。
1.樣品是性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè)，即要選擇承受100%純水且對(duì)性化合物保留好的色譜柱
2. 如果樣品性太，或酸性太；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC（親水色譜），也有使用C18+陰離子對(duì)試劑或陰離子交換色譜柱（缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較，否 則難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑難洗下來(lái)，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)）
3.如果堿性化合物的性太，或堿性太；可以選擇寬pH的C18色譜柱在pH值檢測(cè)（點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價(jià)格也）或者選用HILIC色譜柱（硅膠柱在反相條件下使用，這也是經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法）選擇離子交換柱（缺點(diǎn) 是不能用來(lái)分析其它樣品，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較，否則難重復(fù)實(shí)驗(yàn)）也有使用C18+陰離子對(duì)試劑或陰離子交換色譜柱
4. 若樣品是堿性的；可選擇純硅膠柱（純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱（如性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等），他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
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