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【應(yīng)用手冊合集】探索細胞內(nèi)部的秘密

來源:美谷分子儀器(上海)有限公司   2020年10月28日 10:12  
 
 

【應(yīng)用手冊合集】探索細胞內(nèi)部的秘密

 
 

 

 
 

現(xiàn)代細胞生物學(xué)需要借助于全面的、多種的檢測手段來滿足全新研究方向的需求,每次獲得的成就都會令人無比興奮。細胞熒光成像檢測技術(shù)時至今日已在各個實驗室中得到廣泛的應(yīng)用。

 
 

 

 

 
 

我們的 SpectraMax i3x  iD3&iD5 型多功能微孔板檢測系統(tǒng)多種檢測功能實現(xiàn)不同檢測目的,熒光法下不僅僅可以用于細胞活力分析、檢測細胞的G蛋白偶聯(lián)受體激活過程、ROS ( 活性氧 ) 和分析各種細胞因子含量,甚至能夠用于檢測和分析納米顆粒探針的光譜學(xué)特征和利用其*的蛋白印跡檢測功能分析鑒定 CRISPR/Cas9 基因編輯功能。也可借助內(nèi)置注射器模塊,Westernblot 檢測和成像分析功能和預(yù)置于 SoftMax Pro軟件內(nèi)的檢測模板,方便為我們輕松打開了一扇用于研究蛋白相互作用及細胞周期分析的大門。

 
 

 

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 12篇細胞檢測應(yīng)用手冊單冊

 
 

 

 

 

 
 

1篇:在微孔板讀板機上使用成像和免疫印跡檢測法驗證 CRISPER 編輯的細胞

基因組編輯已被廣泛應(yīng)用于基因表達和蛋白質(zhì)功能的研究,但這些方法中有許多是復(fù)雜的和不準確的。CRISPR / Cas9 系統(tǒng)由于其較高的準確性和易操作性,已經(jīng)成為一種非常流行的基因編輯工具。已知的外源 DNA短序列被表達為 CRISPR 靶向 RNA(crRNA),引導(dǎo) Cas9 酶切割任何含有類似序列的外源 DNA。通過利用這一系統(tǒng),研究人員可以研究基因沉默和轉(zhuǎn)錄調(diào)控的效果,并有可能減輕患病細胞的遺傳疾病。

 
 

 

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CRISPER/Cas9 機制,Cas9 酶被首先結(jié)合的向?qū)?/span> RNA 激活,然后結(jié)合到包含 3-核苷酸 PAM 序列的匹配的基因上。

 
 

 

 

 

 

 
 

2篇:如何利用遠紅外熒光對細胞內(nèi)活性氧進行檢測

活性氧 (Reactive oxygen speciesROS) 是一類由細胞有氧代謝產(chǎn)生的具有化學(xué)反應(yīng)活性的一類含氧分子,參與細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫防御以及維持體內(nèi)動態(tài)平衡等各項生理活動。然而當細胞處于環(huán)境壓力時,胞內(nèi)的 ROS 含量水平就會急劇上升造成核酸、蛋白和脂類物質(zhì)的氧化損傷,從而引起許多生理、病理變化,諸如男性不育、癌癥的發(fā)生等等。

 
 

 

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遠紅外熒光光譜掃描:Cell Meter 深紅色熒光 ROS 檢測試劑的激發(fā)/發(fā)射圖譜如上所示。

 
 

 

 

 

 

 
 

3篇:表面功能化納米顆粒的特征光譜分析

鑒于其在生物醫(yī)學(xué)研究的應(yīng)用潛力,納米技術(shù)是一個快速發(fā)展的領(lǐng)域并受到科學(xué)界的持續(xù)關(guān)注。納米材料通常直徑小于100 nm,足夠能穿透哺乳動物細胞。納米材料具有較大的表面積體積比,因此適于通過表面功能化偶聯(lián)靶向或治療性分子。在全身給藥的情況下,偶聯(lián)的靶向分子可完成對特定細胞群體如腫瘤細胞的標記,而偶聯(lián)的治療性化合物則可以針對標記的細胞群體發(fā)揮作用。

 
 

 

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納米顆粒表面功能化圖解。

 
 

 

 

 

 

 
 

4篇:如何準確評價 HTRF 細胞因子檢測與其細胞活性變化的關(guān)系

本應(yīng)用介紹了如何使用 SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機和 SpectraMax Minimax300 細胞成像儀如何對細胞因子分泌和細胞活性進行分析。本文將介紹 (i) 如何經(jīng)過處理的 PBMC 中誘導(dǎo)細胞因子分泌,(ii) 如何通過HTRF方法檢測細胞因子,(iii)如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox細胞完整性檢測試劑盒評估 PBMC 活性,(iv) 何將細胞因子濃度轉(zhuǎn)化成 PBMC 活性。

 
 

 

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LPS + 地塞米松處理 PBMC。利用 SoftMax Pro 軟件中的分類特性,識別活細胞 ( 紅色 ),但沒有識別的死細胞 ( 藍色 )

 
 

 

 

 

 

 
 

5篇:細胞系開發(fā)過程中 IgG 檢測流程的簡化

在不同的研究人員中,以抗體為基礎(chǔ)的治療藥物的細胞系開發(fā)過程可能有很大不同。終目標是找到可以穩(wěn)定產(chǎn)生大量單克隆抗體的細胞克隆。IgG 產(chǎn)物檢測在開發(fā)和生產(chǎn)單克隆抗體的多個階段都是非常重要的一步。通常 IgG 定量的方法都需要專門的儀器和技術(shù)人員,這里,我們向大家介紹使用 Valitacell 公司的 Valita®TITER實驗來檢測抗體開發(fā)和生產(chǎn)過程中 IgG 的方法。

 
 

 

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從細胞轉(zhuǎn)染到擴大生產(chǎn)的細胞系開發(fā)過程。

 
 

 

 

 

 

 
 

6篇:應(yīng)用微孔板讀板機和雙報告系統(tǒng)檢測 NF-κB 活性

在這里我們將展示如何在哺乳動物細胞模型中,通過雙熒光報告檢測系統(tǒng)和SpectraMax iD5 微孔板讀板機來檢測核轉(zhuǎn)錄因子κB (NF-κB)的活性。NF-κB是參與細胞進程中許多基因表達的主要調(diào)節(jié)者。腫瘤壞死因子α (TNF-α)可以激活細胞信號通路來降解NF-κB的抑制劑,從而促使其釋放并進入核內(nèi),調(diào)節(jié)數(shù)百目的基因的表達。

 
 

 

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NF-κB 信號通路。TNF-α 激活信號層級反應(yīng)使 NF-κB 抑制劑 IKB 降解,并釋放 NF-κB 轉(zhuǎn)錄因子。

 
 

 

 

 

 

 
 

7篇:葡萄酒中殘?zhí)呛康臏y定利用 SpectraMax MiniMax 細胞成像系統(tǒng)檢測細胞周期

球體是小型的 3D 細胞培養(yǎng)微環(huán)境,可以用于諸如低吸附微孔板等特殊的方法進行細胞培養(yǎng)。這種體外 3D 細胞培養(yǎng)模型具有高度的臨床及生物可靠性,并且已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于高通量篩選 (HTS) 和高級細胞培養(yǎng),從而方便對諸如化合物毒性和癌癥等重大疾病進行研究。

 
 

 

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FUCCI 細胞球圖像。

 
 

 

 

 

 

 
 

8篇: SpectraMax 微孔讀板機上利用KASP 基因分型技術(shù)檢測 SNPs

在本篇應(yīng)用文獻中,我們展示了使用來自LGC 基因組學(xué)的 KASP 檢測驗證試劑如何在SpectraMax 微孔讀板機上讀取終的 KASP產(chǎn)物。di一個實驗是為了驗證每種熒光染料都可在讀板機中得到特定的信號,染料包括FAMHEX  FAM/HEX。第二個實驗中,使用由供應(yīng)商提供的已知 DNA 樣品進行KASP 實驗,PCR 產(chǎn)物在讀板機中檢測以驗證樣品的正確基因型。

 
 

 

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KASP 基因分型結(jié)果。

 
 

 

 

 

 

 
 

9篇:SpectraMax iD3微孔板讀板機上進行細胞活性實驗來評估細胞健康狀態(tài)

從活性和凋亡等多個表征評估細胞健康狀態(tài)能協(xié)助我們深入了解多種情況下,包括候選藥物,特定通路的激活、抑制劑處理以及報告基因的表達所帶來的影響。目前有多種方法可用于測定細胞健康狀態(tài),其中比較常見的是通過微孔板讀板機結(jié)合熒光檢測法。該應(yīng)用指南展現(xiàn)了在SpectraMax® iD3多功能微孔板讀板機上應(yīng)用EarlyToxTM系列細胞活性檢測試劑盒進行細胞健康評估。

 
 

 

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細胞活性檢測實驗流程圖

 
 

 

 

 

 

 
 

10篇:借助于具有注射器模塊的 SpectraMax i3x 實時監(jiān)測 G 蛋白偶聯(lián)受體激活過程

在本篇應(yīng)用文獻中,我們介紹了如何利用配有注射器模塊的 SpectraMax®i3x 多功能微孔板讀板機來對兩種不同的細胞系進行鈣離子濃度測定。CHO M1WT3 是采用中國倉鼠卵巢細胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 M1 毒蕈堿的 Gq 受體細胞,1321N1是人星形細胞瘤細胞系具有內(nèi)源性毒蕈堿膽堿能受體,借助于 SoftMax®Pro 軟件的數(shù)據(jù)分析功能jingque獲得兩個細胞系的 EC50 IC50 值,我們與以前使用高通量篩選系統(tǒng)獲得的結(jié)果進行比較。

 
 

 

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SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機進行鈣流檢測。

 
 

 

 

 

 

 
 

11篇:NanoBRET 技術(shù)及如何利用 SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機進行相應(yīng)檢測實驗

本篇技術(shù)性短文介紹了如何利用 SpectraMaxi3x 多功能微孔板讀板機進行 NanoBR ET 檢測,分別介紹了如何利用儀器內(nèi)置的檢測模式進行 NanoBRET 檢測以及如何利用具有更高靈敏度的 NanoBRET 卡盒進行相應(yīng)檢測,如果利用更靈敏的檢測卡盒可將定量檢測下限提高四倍以上。

 
 

 

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NanoBRET檢測模塊 ( 藍色 ) 下和化學(xué)發(fā)光模塊 ( 橙色 ),曲線標配檢測模塊后低檢測下限大約0.58%,光柵模式下檢測下限大約 2.6%。

 
 

 

 

 

 

 
 

12篇:利用 SpectraMax iD3 微孔板讀板機檢測內(nèi)源色氨酸熒光

我們將展示如何運用SpectraMax®iD3多功能微孔板讀板機檢測內(nèi)源色氨酸熒光。色氨酸標準曲線用來顯示檢測方法的高靈敏性,而色氨酸發(fā)射峰值的偏移則用溶菌酶變性實驗來檢測。溶菌酶包含有兩個色氨酸殘基,因此受到紫外光照射時會發(fā)射熒光。當溶菌酶降解時,色氨酸的發(fā)射光峰值會偏移6-10nm。我們可以對降解前后的溶菌酶進行熒光光譜掃描來捕獲和檢測發(fā)生的峰值偏移。

 
 

 

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Spectral Optimization Wizard。

 
 

 

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