【應(yīng)用手冊(cè)合集】探索細(xì)胞內(nèi)部的秘密

第1篇： 在微孔板讀板機(jī)上使用成像和免疫印跡檢測(cè)法驗(yàn)證 CRISPER 編輯的細(xì)胞

基因組編輯已被廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)和蛋白質(zhì)功能的研究，但這些方法中有許多是復(fù)雜的和不準(zhǔn)確的。CRISPR / Cas9 系統(tǒng)由于其較高的準(zhǔn)確性和易操作性，已經(jīng)成為一種非常流行的基因編輯工具。已知的外源 DNA短序列被表達(dá)為 CRISPR 靶向 RNA(crRNA)，引導(dǎo) Cas9 酶切割任何含有類(lèi)似序列的外源 DNA。通過(guò)利用這一系統(tǒng)，研究人員可以研究基因沉默和轉(zhuǎn)錄調(diào)控的效果，并有可能減輕患病細(xì)胞的遺傳疾病。

第2篇：如何利用遠(yuǎn)紅外熒光對(duì)細(xì)胞內(nèi)活性氧進(jìn)行檢測(cè)

活性氧 (Reactive oxygen species，ROS) 是一類(lèi)由細(xì)胞有氧代謝產(chǎn)生的具有化學(xué)反應(yīng)活性的一類(lèi)含氧分子，參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、免疫防御以及維持體內(nèi)動(dòng)態(tài)平衡等各項(xiàng)生理活動(dòng)。然而當(dāng)細(xì)胞處于環(huán)境壓力時(shí)，胞內(nèi)的 ROS 含量水平就會(huì)急劇上升造成核酸、蛋白和脂類(lèi)物質(zhì)的氧化損傷，從而引起許多生理、病理變化，諸如男性不育、癌癥的發(fā)生等等。

第3篇：表面功能化納米顆粒的特征光譜分析

鑒于其在生物醫(yī)學(xué)研究的應(yīng)用潛力，納米技術(shù)是一個(gè)快速發(fā)展的領(lǐng)域并受到科學(xué)界的持續(xù)關(guān)注。納米材料通常直徑小于100 nm，足夠能穿透哺乳動(dòng)物細(xì)胞。納米材料具有較大的表面積體積比，因此適于通過(guò)表面功能化偶聯(lián)靶向或治療性分子。在全身給藥的情況下，偶聯(lián)的靶向分子可完成對(duì)特定細(xì)胞群體如腫瘤細(xì)胞的標(biāo)記，而偶聯(lián)的治療性化合物則可以針對(duì)標(biāo)記的細(xì)胞群體發(fā)揮作用。

第4篇：如何準(zhǔn)確評(píng)價(jià) HTRF 細(xì)胞因子檢測(cè)與其細(xì)胞活性變化的關(guān)系

本應(yīng)用介紹了如何使用 SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機(jī)和 SpectraMax Minimax300 細(xì)胞成像儀如何對(duì)細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞活性進(jìn)行分析。本文將介紹 (i) 如何經(jīng)過(guò)處理的 PBMC 中誘導(dǎo)細(xì)胞因子分泌，(ii) 如何通過(guò)HTRF方法檢測(cè)細(xì)胞因子，(iii)如何用 Molecular Devices 公司的 EarlyTox細(xì)胞完整性檢測(cè)試劑盒評(píng)估 PBMC 活性，(iv) 何將細(xì)胞因子濃度轉(zhuǎn)化成 PBMC 活性。

第5篇：細(xì)胞系開(kāi)發(fā)過(guò)程中 IgG 檢測(cè)流程的簡(jiǎn)化

在不同的研究人員中，以抗體為基礎(chǔ)的治療藥物的細(xì)胞系開(kāi)發(fā)過(guò)程可能有很大不同。終目標(biāo)是找到可以穩(wěn)定產(chǎn)生大量單克隆抗體的細(xì)胞克隆。IgG 產(chǎn)物檢測(cè)在開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)單克隆抗體的多個(gè)階段都是非常重要的一步。通常 IgG 定量的方法都需要專(zhuān)門(mén)的儀器和技術(shù)人員，這里，我們向大家介紹使用 Valitacell 公司的 Valita®TITER實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)抗體開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中 IgG 的方法。

第6篇：應(yīng)用微孔板讀板機(jī)和雙報(bào)告系統(tǒng)檢測(cè) NF-κB 活性

在這里我們將展示如何在哺乳動(dòng)物細(xì)胞模型中， 通過(guò)雙熒光報(bào)告檢測(cè)系統(tǒng)和SpectraMax iD5 微孔板讀板機(jī)來(lái)檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子κB (NF-κB)的活性。NF-κB是參與細(xì)胞進(jìn)程中許多基因表達(dá)的“主要調(diào)節(jié)者”。腫瘤壞死因子α (TNF-α)可以激活細(xì)胞信號(hào)通路來(lái)降解NF-κB的抑制劑，從而促使其釋放并進(jìn)入核內(nèi)，調(diào)節(jié)數(shù)百目的基因的表達(dá)。

第7篇：葡萄酒中殘?zhí)呛康臏y(cè)定利用 SpectraMax MiniMax 細(xì)胞成像系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞周期

球體是小型的 3D 細(xì)胞培養(yǎng)微環(huán)境，可以用于諸如低吸附微孔板等特殊的方法進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。這種體外 3D 細(xì)胞培養(yǎng)模型具有高度的臨床及生物可靠性，并且已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于高通量篩選 (HTS) 和高級(jí)細(xì)胞培養(yǎng)，從而方便對(duì)諸如化合物毒性和癌癥等重大疾病進(jìn)行研究。

第8篇：在 SpectraMax 微孔讀板機(jī)上利用KASP 基因分型技術(shù)檢測(cè) SNPs

在本篇應(yīng)用文獻(xiàn)中，我們展示了使用來(lái)自LGC 基因組學(xué)的 KASP 檢測(cè)驗(yàn)證試劑如何在SpectraMax 微孔讀板機(jī)上讀取終的 KASP產(chǎn)物。di一個(gè)實(shí)驗(yàn)是為了驗(yàn)證每種熒光染料都可在讀板機(jī)中得到特定的信號(hào)，染料包括FAM、HEX 和 FAM/HEX。第二個(gè)實(shí)驗(yàn)中，使用由供應(yīng)商提供的已知 DNA 樣品進(jìn)行KASP 實(shí)驗(yàn)，PCR 產(chǎn)物在讀板機(jī)中檢測(cè)以驗(yàn)證樣品的正確基因型。

第9篇：SpectraMax iD3微孔板讀板機(jī)上進(jìn)行細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)估細(xì)胞健康狀態(tài)

從活性和凋亡等多個(gè)表征評(píng)估細(xì)胞健康狀態(tài)能協(xié)助我們深入了解多種情況下，包括候選藥物，特定通路的激活、抑制劑處理以及報(bào)告基因的表達(dá)所帶來(lái)的影響。目前有多種方法可用于測(cè)定細(xì)胞健康狀態(tài)，其中比較常見(jiàn)的是通過(guò)微孔板讀板機(jī)結(jié)合熒光檢測(cè)法。該應(yīng)用指南展現(xiàn)了在SpectraMax® iD3多功能微孔板讀板機(jī)上應(yīng)用EarlyToxTM系列細(xì)胞活性檢測(cè)試劑盒進(jìn)行細(xì)胞健康評(píng)估。

第10篇：借助于具有注射器模塊的 SpectraMax i3x 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè) G 蛋白偶聯(lián)受體激活過(guò)程

在本篇應(yīng)用文獻(xiàn)中，我們介紹了如何利用配有注射器模塊的 SpectraMax®i3x 多功能微孔板讀板機(jī)來(lái)對(duì)兩種不同的細(xì)胞系進(jìn)行鈣離子濃度測(cè)定。CHO M1WT3 是采用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 M1 毒蕈堿的 Gq 受體細(xì)胞，1321N1是人星形細(xì)胞瘤細(xì)胞系具有內(nèi)源性毒蕈堿膽堿能受體，借助于 SoftMax®Pro 軟件的數(shù)據(jù)分析功能jingque獲得兩個(gè)細(xì)胞系的 EC50和 IC50 值，我們與以前使用高通量篩選系統(tǒng)獲得的結(jié)果進(jìn)行比較。

第11篇：NanoBRET 技術(shù)及如何利用 SpectraMax i3x 多功能微孔板讀板機(jī)進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)

本篇技術(shù)性短文介紹了如何利用 SpectraMaxi3x 多功能微孔板讀板機(jī)進(jìn)行 NanoBR ET 檢測(cè)，分別介紹了如何利用儀器內(nèi)置的檢測(cè)模式進(jìn)行 NanoBRET 檢測(cè)以及如何利用具有更高靈敏度的 NanoBRET 卡盒進(jìn)行相應(yīng)檢測(cè)，如果利用更靈敏的檢測(cè)卡盒可將定量檢測(cè)下限提高四倍以上。

第12篇：利用 SpectraMax iD3 微孔板讀板機(jī)檢測(cè)內(nèi)源色氨酸熒光

我們將展示如何運(yùn)用SpectraMax®iD3多功能微孔板讀板機(jī)檢測(cè)內(nèi)源色氨酸熒光。色氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線用來(lái)顯示檢測(cè)方法的高靈敏性，而色氨酸發(fā)射峰值的偏移則用溶菌酶變性實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)。溶菌酶包含有兩個(gè)色氨酸殘基，因此受到紫外光照射時(shí)會(huì)發(fā)射熒光。當(dāng)溶菌酶降解時(shí)，色氨酸的發(fā)射光峰值會(huì)偏移6-10nm。我們可以對(duì)降解前后的溶菌酶進(jìn)行熒光光譜掃描來(lái)捕獲和檢測(cè)發(fā)生的峰值偏移。