EDTA操作說明書

產品簡介： EDTA 是一種相對較好的螯合脫鈣劑，對組織結構影響小，可以較好的保存組織的某 些酶類，經 EDTA 脫鈣后的組織可以進行免疫組化和原位雜交染色。但是該法脫鈣速度太慢， 一般脫需要數周至數月

保存條件： 2～8°C 保存。 
操作流程： 1、骨組織脫鈣時，取材不易過厚，一般大約 5mm；
2、組織固定后，用 PBS 清洗 3 次，每次 20min；
3、組織用蒸餾水洗清洗 3 次，每次 20min； 
4、組織轉移至 20~30 倍體積的 EDTA 脫鈣液中，脫鈣 10～30 天或更長時間。如果想加快 脫鈣速度，可以置于 37°C 進行脫鈣。如果必要，更換新的 EDTA 脫鈣液繼續(xù)脫鈣，多數組 織脫鈣 2 周～3 個月即可，每周更換一次，直至終點； 
5、用蒸餾水沖洗數次； 
6、常規(guī)脫水、包埋。

注意事項： 1、 厚度 5mm 的骨組織塊脫鈣時間一般脫鈣 10~30 天即可。
 2、 適當加溫能加快脫鈣的速度，一般不應超過 37～40°C，溫度過高容易使骨組織造成松 散解體，尤其不可大于 60°C。
 3、脫鈣應*，防止脫鈣不足或過度。脫鈣程度應控制在不影響組織切片的同時盡量縮短 脫鈣時間，以免脫鈣過長引起組織損害。 
4、 脫鈣用具避免使用金屬容器，盡量使用玻璃容器。
5、 骨組織脫鈣應先固定后脫鈣或脫鈣固定同時進行，不應先脫鈣后固定，以便減少組織的 損傷程度。
 6、 每隔一段時間檢測一次脫鈣程度，避免脫鈣過度，脫鈣過度會增加組織的損傷程度，影 響染色結果。