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實(shí)驗(yàn)技術(shù)|細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇
細(xì)胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細(xì)胞的一種常用和重要的工具，形狀、規(guī)格、用途多樣，你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫？你是否正為如何方便、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱？你對(duì)如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑？對(duì)不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會(huì)？請(qǐng)看丁香園資深站友總結(jié)的「細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇」。
細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型)；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?br />
平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇
不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細(xì)胞都可用，但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少，如做克隆時(shí)，就用96孔平底板；另外，做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)，無(wú)論貼壁和懸浮細(xì)胞，一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致，還便于MTT檢測(cè)。
至于U或V型板，一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面，當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí)，需要二者相互接觸以刺激。因此，一般需要U型板，因細(xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在一個(gè)很小的范圍內(nèi)。V型板的用途更少，一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí)，為了使效靶細(xì)胞緊密接觸，常使用V型板，但這種實(shí)驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后﹐低速離心)。除此之外，圓底還可以拿來(lái)做分析、化學(xué)反應(yīng)、同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn)或是保存樣品用。
孔數(shù)的選擇
流式一般用6孔，MTT一般用96孔，細(xì)胞爬片一般用24孔等，要具體根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)來(lái)定。
Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasakiplate主要是用于晶體學(xué)研究，產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對(duì)晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有sitting和handingdrop兩種方法。兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同，材料上選擇crystalclasspolymer，特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。
細(xì)胞培養(yǎng)板主要材料是treatedsufface，便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)與伸展。當(dāng)然還與浮游細(xì)胞的生長(zhǎng)材料，降低結(jié)合表面積有關(guān)，取決于實(shí)驗(yàn)材料上的應(yīng)用與對(duì)材料的選擇。
細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
用多孔細(xì)胞培養(yǎng)板測(cè)吸光度肯定可以，可以用它來(lái)做樣品的蛋白定量和MTT檢測(cè)。
區(qū)別：酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴，細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng)，但也可以用來(lái)測(cè)蛋白濃度；酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板，一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng)，它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè)，它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。
常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì)影響氣體(氧氣)交換，而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。
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