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ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。ELISA試劑盒在選購時應(yīng)注意以下幾個方面：
1、明確研究種屬：一般來說，廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬，且為*個單詞，檢索種屬的常用語言為英文。
2、明確樣本類型：不同廠家驗證樣本類型不同，即使同一廠家不同試劑盒，其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本，因此購買前需仔細核對。
3、會預(yù)測自己的目標因子的濃度：
4、檢查試劑盒進行過哪些質(zhì)控：質(zhì)控數(shù)據(jù)在說明書中即可找到，在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質(zhì)控實驗，包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應(yīng)測試等，每個數(shù)據(jù)最好都看一下，確保*的結(jié)果重現(xiàn)性及準確性。
5、需檢測的因子數(shù)量：如果待測因子超過 5 個，且樣本量較小時，單因子 ELISA 檢測方法并不是好的選擇。建議考慮多因子檢測方法，可節(jié)約樣本及時間成本，也可保證檢測結(jié)果準確。
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