細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)都要用到血清,而血清又分為胎牛血清、小牛血清和新生牛血清,今天蒂科生物就給大家分享一下他們之間的區(qū)別以及保存方法
胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區(qū)別
1、采血時(shí)間不同
胎牛血清(Fetal Bovine Serum)是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí),通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清(Newborn Calf Serum)是來(lái)自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清(Calf Serum)采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。
2、組份與比例不同
兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。一些生長(zhǎng)因子到胎牛10個(gè)月時(shí)就消失了。
3、用途與用法不同
某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可。使用濃度一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。解凍血清時(shí),推薦我們總結(jié)出來(lái)的三步法(見下表),可預(yù)防沉淀發(fā)生。不推薦血清4℃過夜融化,更不能直接將冷凍的血清放入37℃水浴或者溫箱中。因?yàn)檠逶谌诨瘯r(shí),蛋白先融,冰塊后融,局部蛋白濃度過高,易發(fā)生沉淀。血清在解凍后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
溫度 100ml血清 500ml血清
第一步 室溫 35分鐘 90分鐘
或15-20℃水浴 5分鐘 18分鐘
第二步 20℃水浴 15分鐘 25分鐘
第三步 37℃水浴 20分鐘 35分鐘
注意:在水浴過程中,血清的液面要*浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動(dòng),使血清混勻,但不要產(chǎn)生泡沫!
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