不同實驗中 transwell 小室的選擇和使用

Transwell 小室在細胞實驗中很常用，共培養(yǎng)實驗、趨化實驗、細胞遷移、細胞侵襲以及藥物轉(zhuǎn)運實驗都會用到，但小室的規(guī)格有很多種，不同的實驗需要用到的小室規(guī)格也不同。

根據(jù) transwell 板的不同，transwell 小室可以分為 6 孔板小室、12 孔板小室和 24 孔板小室以及和 transwell 皿配套的 75 mm 直徑的小室；根據(jù)孔徑的不同，從小孔徑到大孔徑又分為 0.4μm 規(guī)格、3μm 規(guī)格、5μm 規(guī)格、8μm 規(guī)格，不同實驗對小室孔徑的要求也不一樣。

小于 3μm 孔徑的小室，細胞不會遷移通過，研究不涉及細胞運動能力，不需要細胞穿過聚碳酸酯膜，應(yīng)該選擇 3μm 以下的孔徑。例如共培養(yǎng)實驗和 caco-2 細胞轉(zhuǎn)運模型實驗。

共培養(yǎng)實驗：常用 0.4、34μm，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞 A 的影響。

caco-2 細胞轉(zhuǎn)運模型：選用 0.44μm 膜，將 Caco-2 細胞以約 l×10 個/mL，每孔 0.5 mL 的密度接種在 Transwell 內(nèi)培養(yǎng) 21d 左右，前 1 周隔天換液，1 周后每天換液。在模型 建立的同時對其跨膜電阻值及堿性磷酸酶活性進行監(jiān)測來判斷模型是否達到轉(zhuǎn)運實驗要求。

涉及到細胞遷移的實驗：要用 5.0、8.0、12.0μm 的小室，這樣上室細胞可穿過聚碳酸酯膜進入下室，計數(shù)進入下室的細胞量可反映細胞的趨化能力、遷移能力和侵襲能力。

趨化性實驗：細胞 B 對細胞 A 的趨化作用，將細胞 A 種于上室，細胞 B 種于下室，可以研究細胞 B 分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細胞 A 的趨化作用；趨化因子對細胞的趨化作用，將細胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細胞的趨化作用。

細胞遷移實驗：常用 8.0、12.0μm 膜，上室種細胞，下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子，細胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計數(shù)進入下室的細胞量可反映細胞的遷移能力。