IP-MS：蛋白質(zhì)互作/后修飾原理

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）原理介紹：

蛋白質(zhì)相互作用（Protein-Protein Interactions, PPIs）和翻譯后修飾（Post-Translational Modifications, PTMs）的數(shù)據(jù)是能顯著提高基礎(chǔ)類(lèi)研究文章檔次的內(nèi)容。篩選和發(fā)現(xiàn)目的蛋白（target）在細(xì)胞中新的互作蛋白或者新的后修飾，免疫沉淀（IP，Immunoprecipitation）結(jié)合LC-MS（液相色譜-質(zhì)譜連用，蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心工具）是目前的主流技術(shù)方案（IP-MS）。通過(guò)一次IP-MS實(shí)驗(yàn)，能高通量的鑒定和篩選到多個(gè)與要研究的目的蛋白（target）存在相互作用的蛋白質(zhì)（蛋白質(zhì)復(fù)合物組分），從而擁有屬于自己的專(zhuān)屬蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)庫(kù)，通過(guò)深入的生物學(xué)功能與分子機(jī)制的分析，能發(fā)表多篇連續(xù)性的學(xué)術(shù)文章。

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）應(yīng)用領(lǐng)域：

免疫沉淀和質(zhì)譜聯(lián)用(IP-MS)，可用來(lái)確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)的特異性相互作用。在現(xiàn)有的抗體驗(yàn)證方法中，這種方法的特別之處在于可以主動(dòng)識(shí)別和定量純化自樣本的實(shí)際抗體靶標(biāo)。與其他評(píng)估抗體特異性的技術(shù)（如，通過(guò)對(duì)基因敲除小鼠來(lái)源樣本進(jìn)行免疫印跡染色，確定某個(gè)消失的條帶）不同，質(zhì)譜法可以直接確定來(lái)源于樣本蛋白的肽段序列。因此，IP-MS是確認(rèn)抗體與預(yù)期靶標(biāo)直接結(jié)合的方法。

免疫沉淀串聯(lián)質(zhì)譜分析（IP-MS）整體服務(wù)方案：

客戶只需提供基因名稱(chēng)和細(xì)胞株即可，我方負(fù)責(zé)完成后續(xù)所有實(shí)驗(yàn)，包括：

基因克隆與慢病毒制備。

穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建與鑒定。

細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。

IP純化蛋白質(zhì)復(fù)合物并SDS-PAGE分離。

切割差異條帶，LC-MS測(cè)試分析。

MS數(shù)據(jù)分析，挑選潛在的候選驗(yàn)證蛋白。

購(gòu)買(mǎi)抗體，進(jìn)行IP結(jié)合Western blot驗(yàn)證。