酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體 表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。
實驗步驟
1.將特異性抗體與固相載體 聯(lián)結,形成固相抗體
2.加受檢標本,保溫反應
3.加酶標抗體,保溫反應。
4.加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。
5.加底終止劑
6.酶標儀檢測
結果展示
實驗完成周期及交付標準
1. 實驗周期:5個工作日
2. 交付標準:ELISA檢測原始OD值、ELISA檢測標準曲線、ELISA檢測目的蛋白濃度值、柱狀圖、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)
需確認的信息
1. 樣本的種屬及類型,是血清還是血漿
2. 樣本數(shù)為多少,是否需要做重復
3. 是否提供試劑盒,需要進口試劑盒還是國產(chǎn)試劑盒
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