宮頸癌是常見的女性惡化腫瘤,其發(fā)生率在女性群體中僅次于乳腺癌。世衛(wèi)組織統(tǒng)計(jì)顯示,2020年全球?qū)m頸癌新發(fā)病例超過60.4萬例,其中近11萬例在中國(guó)。目前關(guān)于宮頸癌發(fā)生機(jī)制尚未*明確,主要與人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染有關(guān),其中HPV16、18、31、45型是宮頸癌的高危型。
為了對(duì)抗這一癌癥,人類研發(fā)出了HPV疫苗。HPV疫苗分為治療性疫苗和預(yù)防性疫苗,目前國(guó)家所提倡接種的HPV疫苗是預(yù)防性疫苗,主要使用基因工程技術(shù)進(jìn)行生產(chǎn),通過誘導(dǎo)特異性中和抗體,阻斷病毒的早期感染來預(yù)防病毒相關(guān)疾病的發(fā)生。
當(dāng)我們?cè)诮臃NHPV疫苗時(shí),能看見疫苗包裝盒上有“釀酒酵母”的字眼。
釀酒酵母是什么?難道HPV疫苗的制作過程跟釀酒有關(guān)系嗎?
釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),又稱面包酵母或者出芽酵母,細(xì)胞為球形或者卵形,直徑5-10μm,是第一個(gè)完成基因組測(cè)序的真核生物,測(cè)序工作于1996年完成。
作為一種單細(xì)胞真核生物,釀酒酵母具有一切真核細(xì)胞生命活動(dòng)最基本特征,又有實(shí)驗(yàn)所需微生物應(yīng)具備的代謝周期快、生長(zhǎng)迅速、操作方便等許多優(yōu)點(diǎn),一直是基礎(chǔ)及應(yīng)用研究的主要對(duì)象,在2000年被NIH選為標(biāo)準(zhǔn)微生物模型系統(tǒng),在食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。
重組全釀酒酵母疫苗是一種新型的基因工程疫苗,以釀酒酵母菌作為抗原表達(dá)載體構(gòu)建的重組全酵母疫苗,既能攜帶特異性目的抗原,又能揮發(fā)出免疫佐劑作用,能有效地誘導(dǎo)出抗原特異性的免疫應(yīng)答,該類疫苗已在抗腫瘤及抗病毒感染的防治研究中,顯示出了很好的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。
1981年開始用釀酒酵母表達(dá)外源基因,目前利用釀酒酵母為宿主系統(tǒng)表達(dá)了許多外源基因產(chǎn)物,如乙型肝炎疫苗、人胰島素、人粒細(xì)胞集落刺激因子、人血管抑制素等。
釀酒酵母在自然界中分布較廣,屬于兼性厭氧微生物,主要是從冰葡萄汁或柑橘果中利用酵母浸出粉胨葡萄糖培養(yǎng)基和麥芽汁瓊脂平皿培養(yǎng)基分離純化而來。
1、富集培養(yǎng):取適量樣品加入富集培養(yǎng)基,進(jìn)行目標(biāo)菌株富集;
2、梯度稀釋:將富集培養(yǎng)液按10倍梯度進(jìn)行稀釋;
DW-9系列微生物試劑分液器
DW-9系列微生物試劑分液器是一款精密輸送液體的電子蠕動(dòng)泵分液系統(tǒng),適用于培養(yǎng)基、緩沖液和稀釋液的自動(dòng)批量分裝,廣泛應(yīng)用于各種食品、藥品企業(yè)、政府檢測(cè)機(jī)構(gòu)和科研單位的專業(yè)微生物實(shí)驗(yàn)室。
3、分離純化:取梯度稀釋液均勻涂布于分離培養(yǎng)基,放置培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng),然后再進(jìn)行目標(biāo)菌株的初篩及復(fù)篩;
DW-16型自動(dòng)細(xì)菌涂布接種儀
DW-16型自動(dòng)細(xì)菌涂布接種儀由放置培養(yǎng)皿的可旋轉(zhuǎn)平臺(tái)(自動(dòng))和可變速驅(qū)動(dòng)電機(jī)組成,是杭州大微專為“經(jīng)典培養(yǎng)法”微生物實(shí)驗(yàn)中的“細(xì)菌涂布接種”環(huán)節(jié)而設(shè)計(jì)制造,塑料平皿適用。
4、菌種鑒定:通過形態(tài)學(xué)特征并結(jié)合生理生化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行菌株鑒定。
杭州大微DW-M80型自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)通過生化反應(yīng)原理(包括酶底物反應(yīng)/糖利用反應(yīng)/同化反應(yīng)/氨基酸實(shí)驗(yàn)等)捕獲細(xì)菌的生化表型特征,對(duì)微生物進(jìn)行鑒定;結(jié)合微生物激光透射比色法,對(duì)抗菌藥敏試驗(yàn)進(jìn)行分析。
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