細胞搖瓶中的懸浮細胞需要消化嗎

細胞搖瓶是培養(yǎng)懸浮細胞常用的一種細胞培養(yǎng)耗材，不同于貼壁細胞，懸浮細胞不依賴于支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長。在細胞傳代前首先要消化細胞，那么，如何消化懸浮細胞呢？

三角細胞搖瓶125ml

從懸浮細胞的定義上來說，懸浮細胞是不貼壁的，所以它不需要酶的作用就可以使其從細胞搖瓶表面脫離。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法（在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下）來處理懸浮細胞，當我們觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至 80%～90%（細胞懸液變黃）的時候，細胞就可以進行傳代操作了。

三角細胞搖瓶500ml

從顯微鏡下觀察，如果沒有細胞碎片、細胞形態(tài)規(guī)則，就可以選擇直接傳代法。將原瓶中的培養(yǎng)基按比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中，然后補加新鮮培養(yǎng)基，然后隔天觀察細胞密度來考慮是否需要補液。如果從顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)較差時，則需要使用離心傳代法，首先，將細胞懸液轉移到離心管內(nèi)，1000rpm 離心 5 min；然后棄去上層清液，輕輕地將細胞沉淀彈散，使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞；用吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養(yǎng)瓶，再加入適量的新鮮培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)。

PETG血清培養(yǎng)基瓶