我們?cè)谑褂眯碌纳V柱應(yīng)該在我們自己的液相色譜儀上進(jìn)行性能測(cè)試,即使用色譜柱附帶的檢驗(yàn)報(bào)告上測(cè)試條件和樣品來(lái)測(cè)定該色譜柱的柱效。并且,在以后的使用中,應(yīng)時(shí)常對(duì)色譜柱進(jìn)行測(cè)試。高效液相色譜柱在使用的過(guò)程中常常有堵塞的現(xiàn)象,造成這種現(xiàn)象的主要原因是:
①溶劑中的不溶物
②樣品中的不溶物
③泵進(jìn)樣器等中的不溶物
④柱內(nèi)不溶物的形成等。
如果當(dāng)色譜柱堵塞以后我們可以對(duì)色譜柱進(jìn)行修復(fù),首先,使用含鹽緩沖液后(如離子對(duì)試劑)應(yīng)用溶解性強(qiáng)的溶劑(如水)進(jìn)行沖洗。其次,先斷開(kāi)檢測(cè)器,然后用對(duì)來(lái)自樣品中的物質(zhì)有強(qiáng)溶解性的溶劑進(jìn)行沖洗,對(duì)于反相色譜柱,可使用甲醇、乙睛、四氫呋喃、氯仿、庚烷等,在此條件下,應(yīng)避免溶劑的pH低于2或高于8。
高效液相色譜柱怎樣避免過(guò)高的柱壓?
雖然高效液相色譜柱能耐受的壓力可達(dá)6000psi (磅/平方英寸) ,但過(guò)高及過(guò)大的壓力變化均會(huì)縮短色譜柱的壽命,避免的方法是:
(1)柱壓過(guò)高時(shí),盡可能采用較小的流速,以不超過(guò)柱最大允許壓力的一半為宜。
(2)當(dāng)流速較大時(shí),應(yīng)采取流速梯度的辦法使流速分步到位。
(3)使用手動(dòng)進(jìn)樣閥時(shí),進(jìn)樣閥的切換要盡可能的快。否則超過(guò)20%的壓力沖擊會(huì)很快使柱報(bào)廢。當(dāng)使用多柱聯(lián)用時(shí),柱切換要避免在高壓下進(jìn)行。
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