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JANUS G3自動化PCR體系構建工作站幫你解決重重困難

來源:上?,|馳儀器有限公司   2022年04月19日 15:57  

PCR技術已應用到生物制藥領域的各個環(huán)節(jié)從前期研發(fā)階段后選序列的篩選,到工藝開發(fā)環(huán)節(jié)穩(wěn)健方法的建立,至生產(chǎn)放行的把控。每一個環(huán)節(jié)都需要倚仗PCR技術的結果作為衡量的依據(jù)。諸如支原體,宿主DNA,內外源性病毒,逆轉錄病毒等風險因子都要求在生產(chǎn)起始、中間過程和終產(chǎn)品階段,進行定性或定量PCR分析,以確保風險因子可控。對CART,TCRT,CAR-NK等細胞治療產(chǎn)品而言,CAR/TCR基因拷貝數(shù),RCR/RCL復制型慢病毒檢測,轉染效率等也都是必需的PCR檢測項目。


PCR體系構建中經(jīng)常遇到的問題

  • 一個樣品多項目檢測,體系構建相當復雜(多引物、探針、酶、dNTP、模板和Mg2+,緩沖液)在過程中易出現(xiàn)加樣錯誤;

  • 操作繁瑣但定量結果判定又很嚴:標曲R2大于0.98,擴增效率介于90-110,低標準點Ct不高于39。一旦結果不達標,又消耗人力重新開展實驗;

  • RCL檢測出現(xiàn)假陽性,無模板的陰性對照(No Template Control,簡稱 NTC)NTC也由于污染造成假陽性;

  • 每日樣品及樣品量不一樣,需要跟進樣品量調整孔板加樣的位置;

  • 由于沒有數(shù)據(jù)追蹤,結果失敗卻很難排查錯誤原因;

  • 不同實驗員不同時間重復性差。

你是否也和我一樣在PCR體系構建中困難重重

如圖所示,CART免疫產(chǎn)品質控中,定量PCR構建體系。(放大)


所以大家都在尋找一個極易上手、高效快速構建各類高精度反應體系,且能標準化的試驗結果。珀金埃爾默(PerkinElmer)公司推出的新一代JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站就是一個不錯的解決方案。可滿足的應用包括DNA/RNA的提取、純化;DNA/RNA 濃度均一化;PCR 和測序產(chǎn)物純化;PCR 反應板的建立(PCR, RT-PCR, Real Time PCR)等相關實驗。


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JANUS G3自動化PCR體系構建工作站 (放大)


JANUS G3自動化PCR體系構建工作站以其穩(wěn)固的性能,靈活的配置,簡便人性化軟件操作,正在逐步瓦解諸多手工操作遇到的難題。


JANUS G3 PCR體系工作站特質

一、消除實驗誤差,提高實驗精度,重復性好

在PCR和qPCR加樣過程中,尤其在配置96孔或者384孔反應板時,采用高通量高精度的自動化PCR構建體系,可以避免在高壓工作下人工疲勞操作帶來的不均一性,減小實驗誤差,并提高樣本處理效率。


1. JANUS G3自動化PCR體系構建工作站具有AccuSense液面感應技術,每通道獨立移液器均可以的進行液面探測,吸頭總是接觸液面下1-3mm,確保能吸到樣品,同時盡量避免液體吸附到吸頭外側臂;確保的移液精度,減少樣品吸附殘留。兼容的電離液和非電離液,包括有機溶液(如DMSO,甲醇)。減少交叉污染,確保數(shù)據(jù)完整性。


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固定鋼針或者吸頭可探測或追蹤液面位置 (放大)


如圖一所示:微量體積移液時,在不同移液體積下,CV值的波動極小,重復性佳。


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圖一:微量體積移液的重復性和穩(wěn)定性 (放大)


如圖二所示:大體積移液時,性均大于99%,CV波動性更小。自動化PCR體系構建工作站移液范圍是0.5ul-5000ul。


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圖二:大體積移液的重復性和性 (放大)


2. 基于系統(tǒng)液的液相驅動移液技術,一方面確保高精度移液,另一方面也避免了氣溶膠的污染(因可用系統(tǒng)液對整個液體管道和一次性吸頭適配器進行清洗)。在大部分的案例中,都能避免使用昂貴的帶濾芯的吸頭,而只用正常的標準吸頭。


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二、靈活性突出,適用于復雜多變的應用場景

1. 移液分液靈活選擇

Varispan具有4通道或者8通道移液臂,可獨立探測液面并在Z軸獨立運動。各通道移液器之間的間距可自動調整,可操作試管、微孔板、深孔板和試劑瓶。同一移液臂,可進行靈活的多通道移液,提高了工作效率。以8通道移液臂為例,進行96 PCR板體系構建,只需不到10分鐘,即可快速完成實驗。相比手工操作,實驗通量更高,也避免加樣錯誤的發(fā)生。

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2. 可整合和擴展性

移板機械臂可同時整合循環(huán)擴增儀。微孔板放入、移出循環(huán)儀、微孔板移動到振蕩器、冷熱溫控、離心機等都可以實現(xiàn)自動化。

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三、簡便易用且功能強大的操作軟件WinPREP

1. 預定義的實驗器具,簡化了實驗程序的建立;具有用戶使用向導,可指導用戶收集相關實驗器具和試劑及位置擺放,儀器維護等。減少客戶對自動化的恐懼,實驗過程能被快速啟動和運行。節(jié)省更多的時間,確保實驗順利運行,獲得更好地實驗數(shù)據(jù)和穩(wěn)定性,這對于新的用戶尤其重要。


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2. WinPREP 軟件具備調用應用程序、追蹤樣品制備過程,以及整合輔助設備的能力,以實現(xiàn)全自動化應用解決方案,滿足樣品在處理過程中的可追溯,可記錄。


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3. 符合 21 CFR Part 11 相關法規(guī)規(guī)范,只有授權用戶才可以訪問設備,數(shù)據(jù)從生成的那一刻起自動保護,滿足數(shù)據(jù)安全性和溯源性要求。


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兩個型號供您選擇


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JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站實現(xiàn)靈活的無人看守的PCR反應建立, 減少技術人員的動手時間,減少人為錯誤,提高實驗穩(wěn)定性和重復性;同時也大大提高了工作通量和質量。相信在不久的將來,JANUS G3 自動化PCR體系構建工作站能夠在越來越多的應用中釋放能量,助力整個生物制藥產(chǎn)業(yè)逐步邁向自動化的進程。



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