高效液相色譜分析是一種高效,快速,準確的分離分析方法,廣泛應(yīng)用于石油化工、生命科學(xué)、環(huán)境、醫(yī)藥及食品安全行業(yè)。本文給大家介紹高效液相色譜分析方法開發(fā)的一般流程。
高效液相色譜分析方法開發(fā)的步驟應(yīng)考慮如下內(nèi)容: a) 信息調(diào)研:通過文獻或其他來源,收集原料藥的相關(guān)信息 b) 溶解度研究:確定溶解度情況和最大吸收波長 c) 色譜條件選擇:根據(jù)溶解度研究結(jié)果、化合物的保留時間等信息確定色譜柱、流動性、進樣樣品 d) 進行初步的HPLC分析檢測,最初階段的HPLC測試傾向采用的參數(shù)見表1。 e) 確定梯度或等度模式 f) 優(yōu)化色譜條件提高分離度:通過改變流動性組成、緩沖鹽、pH、色譜柱、流速、溫度等實現(xiàn)合適的分離度 g) 進行原料藥的強降解試驗確定方法的適用性 h) 確定系統(tǒng)適用性參數(shù) i) 方法總結(jié)并完成開發(fā)報告 j) 進行方法驗證
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