藥廠中無菌隔離器驗證其實比較麻煩

很多藥廠的無菌隔離器驗證不規(guī)范，那么如何規(guī)范驗證呢？

無菌隔離器內(nèi)部通過汽化過氧化氫滅菌器能夠反復(fù)進(jìn)行滅菌，內(nèi)壁可用滅菌劑處理，以去除所有的生物負(fù)載，滅菌完成后，無菌隔離器通過GX空氣過濾器(HEPA)或更高級別的空氣過濾器向其內(nèi)部輸送潔凈空氣來維持內(nèi)部的無菌環(huán)境。

　　無菌隔離器的使用從根本上避免了操作人員與實驗用物品的直接接觸，操作人員無需穿著專用潔凈服，而是通過無菌隔離器上的操作手套或半身操作服對艙內(nèi)物品、儀器進(jìn)行操作。手套-袖套組件或半身操作服是無菌隔離器艙體不可分割的一部分，它們由柔軟的材料制成且與所采用的滅菌劑兼容。

　　因此，無菌隔離器進(jìn)行無菌檢驗，可以避免實驗用物品和輔助設(shè)備被污染，提高了無菌試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。

很多藥廠的無菌隔離器驗證不規(guī)范，那么如何規(guī)范驗證呢？

無菌隔離器驗證方法

　　1、艙體密閉性確認(rèn)

　　通過無菌隔離器全靜態(tài)封閉狀態(tài)下的壓力維持能力來判斷無菌隔離器的密閉性能是否達(dá)到要求。

　?、訇P(guān)閉無菌隔離器房間的門窗，排除對溫度影響較大的其它設(shè)備影響，盡量減少人員出入。

　?、陉P(guān)閉無菌隔離器艙體大門、傳遞門及所有檢測口，開啟無菌隔離器，進(jìn)入壓力運(yùn)行界面，點擊“開壓力測試”后艙體開始自動充氣壓力升至60Pa以上。

　?、郛?dāng)顯示壓力緩緩降至60Pa時，自動開始計時，壓力下降至42Pa時自動停止計時，點擊“壓力測試結(jié)果打印”，打印測試結(jié)果(另傳遞艙密閉性測試等同)。

　?、苡嬎阈r體積泄漏率Q/V=60(Ps—Pt)/(Pt×t)

　　式中：Q/V：小時體積泄漏率;Ps：起始壓力Pt：結(jié)束壓力;t：壓力下降均值，min。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)：1小時泄漏率Q/V≤0.5%。如果三次測試艙體，泄漏率均小于0.5%，說明該無菌隔離器密閉性能良好，可防止外界微生物的進(jìn)入。

　　2、系統(tǒng)的GX完整性檢測

　　通過檢測無菌隔離器的GX過濾器泄漏量，發(fā)現(xiàn)GX過濾器及其安裝過程中存在的缺陷，以便采取補(bǔ)救措施。檢測方法采用PAO法，通過測試GX過濾器上下游氣溶膠濃度比值得出GX過濾器泄漏率。

　?、僭诖郎y定的GX過濾器的上游端發(fā)生PAO氣溶膠作為塵源，待氣溶膠混合均勻后測試PAO濃度，把該濃度設(shè)定為1**%基準(zhǔn)值，然后在GX過濾器下游端逐點掃描，檢測氣溶膠濃度，此時光度計顯示濃度與上游濃度的比值就是泄漏率。

　?、谏嫌味藲馊苣z濃度達(dá)到20～80ug/L。

　?、蹤z漏時采樣頭距離GX過濾器2-3cm，掃描速度在3-5cm/s。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)：檢測點透過率高于0.01%即為漏點，整個過濾器平面透過率均小于0.01%即為合格。

　　3、過氧化氫氣體濃度及分布狀態(tài)確認(rèn)

　　通過對無菌隔離器的VHPS濃度及分布的狀態(tài)進(jìn)行驗證測試，以確認(rèn)其是否滿足艙內(nèi)滅菌的儀器。檢測方法如下：

　?、匍_啟設(shè)備自動運(yùn)行程序。

　?、谠跍缇A段開始時，記錄艙內(nèi)初始過氧化氫濃度和相對濕度讀數(shù)，然后間隔2min記錄一次過氧化氫濃度和相對濕度讀數(shù)，直至滅菌階段結(jié)束。

　?、蹖⑦^氧化氫蒸汽化學(xué)指示劑分布于各測試點，在過氧化氫滅菌過程中觀察其變色情況，并對各點衍射進(jìn)行比對。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)：

　?、賄HPS滅菌系統(tǒng)在正常運(yùn)行情況下，滅菌初始調(diào)節(jié)后艙內(nèi)氣態(tài)過氧化氫濃度應(yīng)不低于125ppm。

　?、诜植加谂搩?nèi)各測試點過氧化氫蒸汽指示劑均能顯著變色，各指示條變色后顏色基本一致，無肉眼可見的顯著性差異。

　　4、過氧化氫滅菌效果確認(rèn)

　　通過滅菌過程中對無菌隔離器內(nèi)部氣化過氧化氫滅菌的滅菌效力進(jìn)行確認(rèn)，確保其達(dá)到預(yù)期的滅菌效果。

　　①在無菌隔離器艙內(nèi)各特定點放置嗜熱脂肪芽孢菌。

　?、谠O(shè)定無菌隔離器運(yùn)行參數(shù)，將運(yùn)行參數(shù)記錄于表格中。

　?、蹎訜o菌隔離器自動運(yùn)行程序，待無菌隔離器通風(fēng)程序結(jié)束后，迅速將BI取下，并在無菌條件下接種至TSB培養(yǎng)基中。

　?、茉跓o菌條件下，將一片未直接接觸VHPS的BI接種至TSB培養(yǎng)基中，作為陽性對照管，另一只含TSB培養(yǎng)基的試管作為陰性對照管。

　?、輰⑺性囼炁囵B(yǎng)基試管置于55-60℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)7天，觀察培養(yǎng)基是否渾濁。

　　判定標(biāo)準(zhǔn)：

　　①同次試驗中，試驗組中接種BI的TSB培養(yǎng)基均為長菌(為渾濁)，陽性對照有菌生長(渾濁)，陰性對照無菌生長，判定滅菌合格。

　　②試驗組中TSB培養(yǎng)基有菌生長，陽性對照組有菌生長，判定為滅菌不合格。

　?、坳栃詫φ战M無菌生長或陰性對照組有菌生長，試驗組結(jié)果不管如何，均判定本次試驗無效。

　　通過對無菌隔離器的驗證，可以證明無菌隔離器是否可用于無菌檢驗，避免了實驗用品和輔助設(shè)備的污染，且日常采取了正確的啟用程序，能夠保證良好的無菌檢驗效果。通過驗證，可以降低日常維護(hù)成本，有利于無菌隔離器的正常運(yùn)行。

公司背景介紹：

華譜&澤恒是專注于為生物制藥行業(yè)提供實驗室儀器計量校準(zhǔn)、GMP驗證服務(wù)/3Q驗證/設(shè)備確認(rèn)/廠房驗證的專業(yè)服務(wù)商。我們給制藥客戶解決的是一站式QC/QA/工程/驗證等事業(yè)部的質(zhì)控外包服務(wù)。

我們活躍于許多關(guān)鍵市場領(lǐng)域，從細(xì)胞/基因治療領(lǐng)域、抗體藥方向、干細(xì)胞治療到疫苗生產(chǎn)等生物制藥領(lǐng)域，一直以來都是圍繞生物醫(yī)藥客戶實現(xiàn)讓“讓制藥體系更安全"為使命，提高服務(wù)的效率、降低行業(yè)的成本、踐行好的客戶服務(wù)體驗。自主品牌：華譜（上海）檢測技術(shù)有限公司、澤恒計量檢測（北京）有限公司。