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CLOVER嘔吐毒素親和柱的IAC-SEP原理和使用注意事項(xiàng)
嘔吐毒素親和柱的原理和使用注意事項(xiàng)
原理
樣品經(jīng)提取液提取、過濾、稀釋，然后通過鍵合有嘔吐毒素特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí)，嘔吐毒素被親和柱中的抗體特異性的吸附，用水或緩沖液將免疫親和柱IAC-SEP上的雜質(zhì)除去，然后用甲醇使抗體變性，從而將嘔吐毒素從親和柱上洗脫下來。最后，用HPLC或熒光計(jì)進(jìn)行定量檢測(cè)
注意事項(xiàng)
使用前，免疫親和柱需回至室溫（22～25℃）。
樣品添加回收試驗(yàn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)品添加到樣品中，靜置2小時(shí)后或過夜，再進(jìn)行樣品前處理，否則會(huì)出現(xiàn)回收率偏低的現(xiàn)象。
3) 操作步驟中，樣品過柱，淋洗，洗脫時(shí)，一定要控制好流速，不能太快，否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低。
4) 如果將標(biāo)準(zhǔn)品直接過柱驗(yàn)證回收率時(shí)，一定要確保標(biāo)準(zhǔn)上柱液中甲醇濃度不要超過5%，否則會(huì)影響柱子的吸附能力。
5) 試驗(yàn)中使用的玻璃儀器等，一定要清洗干凈，尤其是用次氯酸等處理過的儀器，否則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏低。
6) 當(dāng)用氮?dú)鉂饪s洗脫液時(shí)，氮?dú)饬鞑灰螅駝t會(huì)損失部分嘔吐毒素。
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