ibidi聚合物蓋玻片有何魔力可以吸引到細(xì)胞愛好者和顯微鏡學(xué)家

　　您聽說過有關(guān)ibidi聚合物蓋玻片的完整故事嗎？畢竟，它是我們µ-Slides、µ-Dishes和µ-Plates的核心，在很大程度上促成了我們的成功。

　　這一切都始于2000年代初，當(dāng)時(shí)三名博士生和他們的PI有一個(gè)愿景，即成立一家通過結(jié)合細(xì)胞培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡來*改變基于細(xì)胞的分析的公司。到目前為止，細(xì)胞生物學(xué)家不得不在對細(xì)胞生長有利但對成像不利（例如，聚苯乙烯制成的組織培養(yǎng)瓶）或?qū)Τ上裼欣珜?xì)胞生長不利（例如，玻璃蓋玻片）的表面之間進(jìn)行折中。

　　這種困境促使ibidi創(chuàng)始人開始尋找一種即具有玻璃光學(xué)特性的材料，同時(shí)又能保證良好的細(xì)胞粘附和生長。他們最終發(fā)現(xiàn)了一種具有出色光學(xué)質(zhì)量的聚合物箔，這就是ibidi聚合物蓋玻片。它可以粘合到上部結(jié)構(gòu)，這種組合是第一個(gè)ibidi顯微鏡室。然而，這種特殊的聚合物箔非常疏水，細(xì)胞不會(huì)粘附在上面。幸運(yùn)的是，創(chuàng)始人發(fā)現(xiàn)聚合物箔可以通過物理處理來解決這個(gè)問題，特殊的表面處理ibiTreat誕生了！

　　ibidi聚合物蓋玻片的光學(xué)特性

　　使用帶有聚合物蓋玻片底部的ibidi實(shí)驗(yàn)室器具進(jìn)行顯微鏡檢查的科學(xué)家們通常甚至沒有意識(shí)到它不是由玻璃制成的——僅僅是因?yàn)槟鸁o法分辨成像質(zhì)量的差異。

　　那么，這是為什么呢？某些材料特性對于高質(zhì)量的顯微鏡檢查是不可少的。我們將仔細(xì)研究其中五個(gè)參數(shù)（蓋玻片厚度、折射率、阿貝數(shù)、透射率和自發(fā)熒光），以及ibidi聚合物蓋玻片的規(guī)格與玻璃和傳統(tǒng)聚苯乙烯組織培養(yǎng)容器的比較。

　　蓋玻片厚度

　　蓋玻片的厚度在成像質(zhì)量中起著重要作用，因?yàn)榇蠖鄶?shù)顯微鏡物鏡都設(shè)計(jì)為聚焦在具有一定厚度的蓋玻片頂部的樣本上（圖1）。在細(xì)胞顯微鏡中，標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度為0.17mm(170µm+20/–10µm)，對應(yīng)于#1.5蓋玻片。雖然大多數(shù)聚苯乙烯組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的底部厚度為500–1000µm，但ibidi聚合物蓋玻片的厚度與標(biāo)準(zhǔn)#1.5玻璃蓋玻片的厚度相同。

　　圖1：顯微鏡物鏡針對170µm的標(biāo)準(zhǔn)蓋玻片厚度進(jìn)行了優(yōu)化（左）。使用其他蓋玻片厚度高分辨率物鏡無法聚焦在樣品上（右）。

　　折射率

　　ibidi聚合物蓋玻片的折射率（測量特定材料內(nèi)的光速）為1.52，因此與玻璃的折射率相同。相比之下，由聚苯乙烯制成的標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿的折射率為1.58。這個(gè)值很重要，因?yàn)轱@微鏡物鏡是為折射率為1.52的蓋玻片設(shè)計(jì)的。

　　透光率

　　為了提供高質(zhì)量的成像結(jié)果，顯微鏡載體的傳輸能力必須在各種不同的波長上都很高。玻璃和ibidi聚合物蓋玻片就是這種情況。標(biāo)準(zhǔn)聚苯乙烯材料會(huì)阻擋紫外線，這使得它們并不真正適用于所有顯微鏡技術(shù)和熒光團(tuán)（圖2）

　　圖2：各種蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料在不同波長下的透射曲線。

　　自發(fā)熒光

　　顯微鏡載體材料的自發(fā)熒光特性可以通過在顯微鏡下顯示為高背景信號來干擾成像過程。雖然ibidi聚合物蓋玻片材料和玻璃的自發(fā)熒光非常低，但由聚苯乙烯制成的培養(yǎng)皿具有非常高的自發(fā)熒光（圖3）。

　　圖3：不同蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料在不同波長下的自發(fā)熒光強(qiáng)度。

　　ibidi聚合物蓋玻片的細(xì)胞培養(yǎng)特性

　　到目前為止，我們已經(jīng)談了很多關(guān)于ibidi聚合物蓋玻片的光學(xué)特性以及它如此適合高質(zhì)量成像的原因，但細(xì)胞呢？

　　他們在這個(gè)表面上感覺舒服嗎？他們喜歡依附并在上面成長嗎？答案很簡單，是的！這就是為什么：

　　表面剛度

　　首先，塑料比玻璃更柔軟，這使得它的表面彈性更類似于體內(nèi)組織(Discheretal.,2005;）

　　圖4：不同組織以及蓋玻片和細(xì)胞培養(yǎng)材料的表面彈性。

　　組織培養(yǎng)處理

　　其次，與玻璃相比，塑料的表面可以進(jìn)行修飾，使其更具親水性，這是大多數(shù)貼壁細(xì)胞類型所喜歡的。這種物理表面處理（不是涂層）通常稱為組織培養(yǎng)處理。大多數(shù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的塑料容器都是以這種方式修改的。在ibidi，我們將聚合物蓋玻片的組織培養(yǎng)表面改性稱為“ibiTreat”，它不是蛋白質(zhì)涂層，而是增強(qiáng)細(xì)胞附著的物理表面處理。當(dāng)然，額外的蛋白質(zhì)涂層可以應(yīng)用于未涂層的ibidi聚合物蓋玻片或ibiTreat版本，而不會(huì)影響光學(xué)質(zhì)量。

　　透氣性

　　細(xì)胞喜歡在ibidi聚合物蓋玻片上生長的第三個(gè)原因是其透氣性。這允許通過整個(gè)底部表面進(jìn)行氣體交換，為細(xì)胞提供新鮮的O2并允許CO2離開細(xì)胞環(huán)境（圖5）。

　　圖5：與玻璃（右）相比，聚合物蓋玻片允許通過底部表面進(jìn)行氣體交換（左）。

　　鑒于上述所有原因，ibidi聚合物蓋玻片結(jié)合了兩方面的優(yōu)點(diǎn)——高分辨率成像的理想光學(xué)和細(xì)胞附著和生長的*佳表面*。還是不服氣？可立即訂購免費(fèi)樣品。