新品上市:明膠酶譜實驗配套用的配膠試劑盒
很多老師在使用我們的明膠酶譜試劑盒時候,還需要自己準(zhǔn)備配置大膠小膠用的試劑,上海信帆特別推出配套用的配膠試劑盒,一步解決實驗中遇到的各種問題,下面我們一起來了解一下吧、
描述:本產(chǎn)品提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制高質(zhì)量的各種濃度的變性PAGE膠,方便,快捷。本試劑盒至少可以配制30塊常規(guī)大小的PAGE膠,并且其中的分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液中已加入10%SDS,使用時無需另外加入。
組成:
產(chǎn)品名稱 | 包裝 | 保存條件 |
30%Acr-Bis(29:1) | 100ml | 2-8℃ 避光 |
分離膠緩沖液 | 80ml | 室溫 |
濃縮膠緩沖液 | 25ml | 室溫 |
APS(過硫酸銨) | 0.5g | 室溫 |
TEMED | 1ml | 室溫、避光 |
*試劑盒中提供的APS(過硫酸銨)為固體粉末,使用前加入雙蒸水溶解即配制成10%APS(0.5g APS加入5ml雙蒸水),將溶液分裝后置于-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。
操作步驟:根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的凝膠濃度,不同濃度的SDS-PAGE分離膠的最佳分離范圍參考附表1。
1.灌制分離膠
(1)參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。
(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chǎn)生氣泡。
(4)將分離膠溶液灌入凝膠玻璃槽中,然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3cm的水層,用于壓平液面。
(5)靜置30-60min,至分離膠凝固。
2.灌制濃縮膠
(1)去除覆蓋在分離膠上的水層,并用濾紙吸干,水份吸不干,可能會導(dǎo)致濃縮膠和分離膠分開。
(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。
(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chǎn)生氣泡。
(4)將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,插入樣品梳,避免產(chǎn)生氣泡,靜置20-30min,直至濃縮膠聚合。
(5)待凝膠聚合后,小心拔下梳子,以免破壞加樣孔。
(6)進(jìn)行常規(guī)電泳。
注意事項:
1.10%APS配置好后,應(yīng)當(dāng)-20℃保存,并且應(yīng)盡量減少室溫存放時間,以防失效。
2.TEMED易揮發(fā),使用后請擰緊瓶蓋。
3.凝膠凝聚的速度與溫度等關(guān)系密切,可通過調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量,控制凝膠的聚合速度,凝膠聚合過快不利于操作。
4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作時請穿實驗服并戴手套。
5.在凝膠配制過程中,應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡。
6.在分離膠上層加蒸餾水時要小心操作,加水時速度不宜過快。
新品上市:明膠酶譜實驗配套用的配膠試劑盒
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