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Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù)一步到位

來源:上海信帆生物科技有限公司   2022年12月15日 13:10  

Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù)一步到位

信帆生物提供Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù),老師僅需要提供樣本,我們提供實驗外包服務(wù)。

預(yù)實驗的內(nèi)容如下:
1)確定一抗的稀釋比例和孵育時間;
2)選擇合適的封閉液及封閉時間;
3)調(diào)節(jié)合適的上樣量,使內(nèi)參條帶灰度值趨于一致。

抗體使用有哪些注意事項?
使用抗體前需仔細(xì)閱讀說明書,了解抗體的保存條件以及不同用途下的推薦稀釋比例。較高濃度的抗體(>0.5mg/mL)通常性質(zhì)更穩(wěn)定,受生產(chǎn)工藝和成本控制等因素影響,不同品牌的抗體的濃度也不相同,所以購買時應(yīng)注意比較,經(jīng)驗不足的實驗者往往被抗體的體積迷惑,要注意相同質(zhì)量下低濃度的抗體體積反而更大。

實驗流程:
蛋白提取-制膠-電泳-轉(zhuǎn)膜-封閉-一抗孵育-二抗孵育-化學(xué)發(fā)光-結(jié)果分析;
送樣運輸要求:新鮮組織,100mg以上,干冰運輸。細(xì)胞量為5*10^6以上,收集細(xì)胞沉淀,干冰運輸。

WB相關(guān)檢測樣本準(zhǔn)備及要求

WB檢測:(檢測某種蛋白的有無及含量差異)
組織樣本:
1、 組織取樣時洗凈血污,液氮或干冰速凍-80℃保存,保存時間3個月內(nèi)為宜,時間過長蛋白可能降解。
2、標(biāo)本量100mg(黃豆大小)以上。骨頭、脂肪蛋白含量較少組織需提供200-300mg。

細(xì)胞樣本:
1.活細(xì)胞匯合度70%-80%,裝滿新鮮培養(yǎng)基,不透氣培養(yǎng)瓶,封口膜封口常溫運輸;
2.細(xì)胞沉淀;
3.細(xì)胞上清,干冰運輸。

其他特殊要求:    
如客戶提供試劑盒,要求提取特殊蛋白,需要提前和實驗室溝通,并且準(zhǔn)備好實驗樣本,保證樣本量充足。

信帆生物對質(zhì)量的控制涵蓋生產(chǎn)、放行、市場質(zhì)量反饋的全過程,包括原輔料、包裝材料、工藝用水、中間過程及成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和分析方法的建立、取樣、檢驗和產(chǎn)品穩(wěn)定性考察和市場不良反饋樣品的復(fù)核等工作,確保產(chǎn)品的精確度、穩(wěn)定性。

Western Blot(WB)實驗技術(shù)服務(wù)一步到位

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