STED顯納鏡顯示線粒體蛋白質(zhì)的合成情況

人類線粒體DNA編碼了13種重要的多肽，這些多肽是連接氧化磷酸化（OXPHOS）復(fù)合物的多亞基復(fù)合物的組成部分，這些復(fù)合物主要存在于內(nèi)陷的嵴膜上。內(nèi)界膜（IBM）含有豐富的動態(tài)接觸位點，用于從細(xì)胞膜導(dǎo)入蛋白質(zhì)的移位酶。

大多數(shù)OXPHOS亞單位采用核編碼，因此必須通過外膜在與內(nèi)界膜的接觸位點處從胞漿中導(dǎo)入。

由于大多數(shù)OXPHOS成分導(dǎo)入后需與mtDNA編碼的成分整合組裝，那么線粒體內(nèi)翻譯發(fā)生于何處？

由于線粒體編碼的成分也是這些復(fù)合物的組成部分，所以蛋白質(zhì)合成發(fā)生于何處？

題圖：以STED顯納鏡分辨率拍攝的人類線粒體網(wǎng)絡(luò)截面。(更多細(xì)節(jié)見圖1）。

本論文采用了基于點擊化學(xué)的方法，并結(jié)合受激發(fā)射損耗顯納鏡（STED）來解決以上問題。報告顯示，在培養(yǎng)的人類細(xì)胞中，大部分線粒體蛋白質(zhì)的合成是在嵴膜上檢測到的，且在空間上與RNA加工和成熟的位點相分離。

圖1：圖片顯示了人類線粒體網(wǎng)絡(luò)截面，以共聚焦顯微鏡和STED顯納鏡的分辨率拍攝，用775nmSTED激光器損耗AF594，用660nmSTED激光器損耗AF532。這些圖片是顯示新合成蛋白質(zhì)的亞線粒體位置的關(guān)鍵圖像。綠色的熒光信號代表新合成的線粒體蛋白，品紅色是線粒體內(nèi)界膜中發(fā)現(xiàn)的線粒體蛋白（TIM23）的免疫熒光抗體。